黄卡瓦胡椒素B下调雄激素受体对三阴性乳腺癌增殖和迁移的影响OA北大核心CSTPCD

目的探讨黄卡瓦胡椒素B(FKB)下调雄激素受体(AR)对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖和迁移的影响。方法基于GEPIA2数据库分析乳腺癌组织及正常乳腺组织中AR的表达情况。采用Western blotting检测6种乳腺癌细胞系(SUM159PT、MCF-7、T47D、BT474、Hs-578T和MDB-MA-231)中雌激素受体(ER)、人表皮生长因子受体2(HER2)、孕激素受体(PR)和AR蛋白的表达情况。在正常或雄激素剥夺条件下,使用CCK-8法检测不同浓度(0、10、20、30、40、50、60μmoL/L)FKB处理不同时间(24、48、72 h)对SUM159PT细胞增殖活性的影响。利用30μmoL/L FKB处理SUM159PT细胞0、4和8 h后,采用qRT-PCR和Western blotting检测AR mRNA及蛋白的表达情况。在雄激素剥夺的条件下,取SUM159PT细胞设置对照组(0.1%DMSO处理)、二氢睾酮(DHT)组(10 nmol/L DHT处理)、FKB组(15μmol/L FKB处理)、DHT+FKB组(10 nmol/L DHT+15μmol/L FKB处理)、恩杂鲁胺(ENZA)组(40μmol/L ENZA处理)及DHT+ENZA组(10 nmol/L DHT+40μmol/L ENZA处理)。采用CCK-8法、Transwell实验和克隆形成实验检测各组细胞增殖、迁移和克隆形成能力,Western blotting检测各组上皮-间质转化(EMT)相关蛋白(N-cadherin、Occludin、Vimentin)及AR蛋白的表达水平。结果乳腺癌组织中AR mRNA表达水平明显高于正常乳腺组织(P<0.05)。除MDB-MA-231外,AR在其他5种乳腺癌细胞系(SUM159PT、MCF-7、T47D、BT474和Hs-578T)中均有表达。FKB可下调SUM159PT细胞中AR mRNA和蛋白表达水平(P<0.001)。Western blotting检测结果显示,DHT可诱导SUM159PT细胞中AR蛋白表达水平上调,而FKB抑制DHT诱导的AR蛋白表达水平上调(P<0.01)。FKB和ENZA均抑制SUM159PT细胞的增殖和迁移能力,并逆转DHT诱导的细胞增殖和迁移能力增加(P<0.05)。FKB和ENZA均可降低N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平,并逆转DHT诱导的N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平上调(P<0.05)。此外,FKB还可增加Occludin蛋白的表达,逆转DHT导致的Occludin蛋白表达降低(P<0.05)。结论FKB可能通过调节AR的表达抑制TNBC细胞的增殖、迁移以及克隆形成能力,从而抑制TNBC的进展。