青藤碱联合索拉非尼对肝癌 HepG2细胞增殖、迁移及凋亡的影响OACSTPCD

目的探究青藤碱与索拉非尼联合应用对肝癌HepG2细胞生物学功能的协同抑制作用,并对其潜在的相关分子机制进行初步探讨。方法通过MTT、平板克隆、细胞划痕、Transwell及Hoechst 33342/PI双染实验分别评价2种药物单独及联合应用后对HepG2细胞增殖、迁移及凋亡能力的影响;通过ROS试剂盒分别检测HepG2细胞经各组药物处理后ROS表达的变化,利用分子对接技术预测青藤碱与索拉非尼抗肝癌主要作用靶点结合的潜力,通过Western blot实验检测联合给药组VEGFR2、STAT3、p-STAT3蛋白表达水平的变化以进行验证,并检测下游MMP2、MMP9、BCL-2、BAX、Cleaved-Caspase3的蛋白表达水平。结果青藤碱、索拉非尼均可显著抑制HepG2细胞存活率(P<0.05),并且呈现时间及剂量依赖性;MTT、平板克隆、细胞划痕、Transwell及Hoechst 33342/PI双染实验结果表明两药联合应用可以对HepG2细胞分别产生协同抑制增殖、迁移及促进细胞凋亡的作用;联合用药组较单药给药组显著增强ROS的表达;分子对接及Western blot结果表明联合用药组较单药组可以显著抑制VEGFR2、p-STAT3的表达水平,并降低迁移关键蛋白MMP2、MMP9的表达水平、上调BAX/BCL-2比值及Cleaved-Caspase 3的表达(P<0.05)。结论青藤碱与索拉非尼联合使用在体外能够协同抑制肝癌HepG2细胞增殖、迁移并诱导细胞凋亡,其机制可能与下调VEGFR2/STAT3通路及通路下游相关分子有关。