基于PI3K/AKT/mTOR信号通路探讨和枢消积丸对H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤生成的影响及作用机制OACSTPCD

目的:通过体内实验研究和枢消积丸(Heshu Xiaoji prescription,HXP)对H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤生成的影响以及对PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的影响,探究其抑制肿瘤生长的作用机制。方法:制备H22肝癌荷瘤小鼠模型,随机分为空白对照组、模型组,和枢消积丸低、中、高剂量组(1.37、2.73、5.46g/kg),索拉非尼组(0.03g/kg),联合组(5.46g/kg和枢消积丸和0.03g/kg索拉非尼),每组5只,接种第6天开始给药,连续14d,记录小鼠体质量并观察一般情况;末次给药后次日处死小鼠,剥取肿瘤称质量,计算抑瘤率。苏木素-伊红(HE)染色检测观察肿瘤组织形态变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤组织匀浆液IL-1β,TNF-α含量,免疫组化法以及Western-bloting法测定PI3K/AKT/mTOR信号通路中相关蛋白表达。结果:和枢消积丸能明显改善H22肝癌荷瘤小鼠的精神、活动状态,和枢消积丸低、中、高剂量组,索拉菲尼组,联合组的抑瘤率分别为23.9%、38.6%、64.5%、53.1%、76.6%(P<0.05);与模型组相比,各治疗组能明显降低肿瘤细胞密度,引起肿瘤细胞坏死;与模型组比较,各给药组肿瘤组织中IL-1β含量不同程度升高(P<0.05),与模型组比较,和枢消积丸高剂量组、索拉菲尼组以及联合组肿瘤组织中TNF-α含量不同程度升高(P<0.05);免疫组化结果显示,与模型组比较,联合组、和枢消积丸高剂量组PI3K,AKT,mTOR蛋白表达均明显下降;Western-bloting结果提示,与模型对照组相比较,各治疗组的P-PI3K、P-AKT、P-mTOR蛋白表达明显减少,和枢消积丸中、高剂量组、索拉菲尼组、联合组肿瘤组织的PPI3K/PI3K、P-AKT/AKT、P-mTOR/mTOR蛋白表达显著下调(P<0.05)。结论:和枢消积丸对H22肝癌荷瘤小鼠的肿瘤生成具有较为显著的抑制作用,其作用机制可能与下调PI3K/AKT/mTOR信号通路中关键蛋白表达有关。