NEK8调控Ⅰ型干扰素信号通路的初步研究OA北大核心CSTPCD
为探究RLR通路中激酶NEK8对Ⅰ型干扰素的调控作用及其具体作用机制,笔者利用双萤光素酶报告系统检测SeV刺激下NEK8对IFN-β-Luc.,IRF3介导的启动子ISRE-Luc.以及NF-κB-Luc.的调控作用;转染不同浓度的NEK8,分析其对IFN-β-Luc.激活的调控是否是浓度依赖性的;检测NEK8对IL-6-Luc.和IRF-1-Luc.激活的调控作用来分析NEK8对IFN-β启动子调控的特异性;转染不同阶段的信号蛋白,分析NEK8在IFN-Ⅰ通路中发挥作用的具体位置;利用qRT-PCR技术分析NEK8对IFN-ⅠmRNA水平的调控作用及其特异性.结果显示:NEK8能够负调控RLR通路中IFN-β的启动子以及IRF3介导的启动子的激活,而对NF-κB启动子的激活无调控作用并发现其对IFN-β启动子的抑制作用是浓度依赖性的;NEK8对TNF-α诱导的IL-6启动子的激活以及IFN-γ诱导的IRF-1的激活均无调控作用表明其特异性负调控IFN-β-Luc.的激活;并发现其作用位点位于VISA和TBK1之间,NEK8特异性地负调控RLR通路中SeV或poly(I:C)刺激下IFN-β,CXCL10 mRNA的转录水平,而对IL-6 mRNA的转录水平无影响,并且其对TNF-α诱导的IL-6 mRNA以及IFN-γ诱导的IRF-1 mRNA水平无调控作用.该实验首次发现了在RNA病毒感染时,NEK8特异性地对IFN-β启动子的激活及其mRNA水平的负调控作用,并证明其发挥作用的位点在VISA和TBK1之间.
潘利洁;孙悦;俞馨;余莉;曹苑苑;
安徽医科大学基础医学院,安徽合肥230032 安徽医科大学动物源性传染病安徽省重点实验室,安徽合肥230032 安徽医科大学人畜共患病安徽高校省级重点实验室,安徽合肥230032安徽医科大学临床医学院,安徽合肥230031
基础医学
Ⅰ型干扰素NEK8RIG-I天然免疫
《安徽大学学报（自然科学版）》 2024 (005)
P.94-101 / 8
国家自然科学基金青年基金资助项目(81802003);安徽省高校科研基金资助项目(2022AH050751);安徽医科大学博士科研基金资助项目(xj201725);安徽省新时代育人质量工程项目(2022jyjxggyj224)。
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