莱菔硫烷下调PI3K/Akt信号通路对高糖诱导人血小板凋亡的保护作用OA北大核心CSTPCD

目的 探讨莱菔硫烷(sulforaphane, SFN)对高糖(high glucose, HG)诱导人血小板凋亡的保护作用及机制。方法 将不同浓度(5、10、20μmol/L)的SFN或溶剂对照(0.05%DMSO)与健康人纯化血小板在体外共同孵育40 min,然后加入normal glucose(NG, 5 mmol/L)或HG(25 mmol/L)的葡萄糖溶液干预血小板90 min,用流式细胞术检测血小板线粒体膜电位(ΔΨm)去极化、磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)暴露和胞内总活性氧(reactive oxygen species, ROS)生成水平,用蛋白免疫印迹法检测PI3K、Akt蛋白磷酸化水平。结果 与NG组相比,HG可显著增加血小板ΔΨm去极化和PS暴露水平(P <0.001),且可被不同浓度的SFN显著抑制(P <0.001)。机制上,与溶剂对照组相比,SFN显著下调HG诱导的血小板PI3K(P <0.01)和Akt(P <0.05)蛋白的磷酸化水平,显著降低HG诱导的胞内总ROS生成水平(P <0.001);PI3K的特异性激动剂740 Y-P可完全逆转SFN对HG诱导的PI3K和Akt蛋白磷酸化的抑制作用,部分逆转SFN对总ROS生成、ΔΨm去极化和PS暴露的抑制作用。结论 SFN在体外具有保护HG诱导健康人血小板凋亡的作用,其作用机制可能是下调PI3K/Akt介导的信号通路。