microRNA-9的表达及其负性调控BAG4对胃癌细胞增殖与侵袭的影响OA北大核心CSTPCD

背景与目的:研究显示,microRNA-9(miR-9)在多种恶性肿瘤中表达下调,但其在胃癌中的表达情况及功能尚有待明确。笔者前期通过生物信息学方法预测Bcl-2相关永生基因4(BAG4)可能是miR-9的靶基因,并且发现BAG4在胃癌组织中呈高表达。因此,本研究探讨miR-9在胃癌中的表达与功能,及其与BAG4的关系。方法:采用qRT-PCR法检测胃癌组织与癌旁组织,以及胃癌细胞系与正常胃黏膜细胞中miR-9的表达水平。分别用miR-9模拟物和miR-9抑制物过表达和敲低胃癌细胞的miR-9后,采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖活性,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。荧光素酶报告基因实验分析miR-9和BAG4的靶向关系,并用qRT-PCR法和Western blot检测转染miR-9模拟物和si-BAG4的胃癌细胞中BAG4的表达,以及相关功能实验加以验证。结果:miR-9在胃癌组织(vs.癌旁组织)和胃癌细胞系(vs.正常胃黏膜细胞)中的表达均明显降低(均P<0.05)。miR-9的表达与胃癌患者的肿瘤大小、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移和TNM分期明显有关(均P<0.05)。miR-9高表达胃癌患者的总生存率明显高于miR-9低表达胃癌患者(P=0.028)。胃癌细胞过表达miR-9后,增殖和侵袭能力明显减弱,而敲低miR-9后,增殖和侵袭能力明显增强(均P<0.05)。荧光素酶报告基因实验显示BAG4是miR-9下游的靶基因。转染miR-9模拟物或si-BAG4的胃癌细胞中BAG4的mRNA与蛋白表达均明显降低,而转染miR-9抑制物胃癌细胞中BAG4的mRNA与蛋白表达均明显降低(均P<0.05)。转染si-BAG4的胃癌细胞的增殖与侵袭能力明显降低,同时转染miR-9抑制物可逆转si-BAG4对胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响(均P<0.05)。结论:miR-9在胃癌中表达降低,且其表达与胃癌的不良生物学特征密切相关,其作用机制可能通过负性调控BAG4的表达,从而影响胃癌细胞的增殖和侵袭。