苏黄止咳胶囊中白花前胡甲素对咳嗽变异性哮喘的改善作用OA北大核心CSTPCD

目的探讨苏黄止咳胶囊中白花前胡甲素对咳嗽变异性哮喘(CVA)的影响。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(0.5 mg/kg)、苏黄止咳胶囊组(7 g/kg)和白花前胡甲素低、中、高剂量组(15、30、60 mg/kg),采用腹腔注射致敏剂(1 mg/mL卵清蛋白和10 mg/mL氢氧化铝)和雾化吸入1%卵清蛋白的方法构建CVA大鼠模型,第14天起灌胃给予相应剂量药物,给药14 d后,HE、Masson和PAS染色观察肺组织病理变化,血细胞分析仪检测大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞数,ELISA法检测BALF中IL-4、IL-5、IL-13、MUC5AC水平。采用脂多糖(LPS)诱导建立RAW264.7细胞炎症模型,分别以4、8、16μmol/L白花前胡甲素和0.25 mg/mL苏黄止咳胶囊处理,Griess法检测细胞中NO水平,荧光显微镜下观察细胞中ROS表达。RT-qPCR法检测肺组织和细胞中IL-6、IL-1β、COX-2、iNOS、PPAR-γmRNA表达,Western blot法检测肺组织和细胞中p-P65、P65、p-IκBα、IκBα、NLRP3、caspase-1(p20)、IL-1β蛋白表达。结果体内实验结果表明,白花前胡甲素能减少CVA大鼠咳嗽次数(P<0.01),延长咳嗽潜伏期(P<0.05,P<0.01),减少BALF中嗜酸性粒细胞和中性粒细胞数(P<0.05,P<0.01),降低BALF中IL-4、IL-5、IL-13、MUC5AC水平(P<0.01)和肺组织中IL-6、IL-1β、COX-2、iNOS mRNA表达(P<0.05,P<0.01),降低P65、IκBα蛋白磷酸化及NLRP3、caspase-1(p20)、IL-1β蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。体外实验结果表明,白花前胡甲素能抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中NO的释放,降低细胞中ROS水平(P<0.01);降低细胞中IL-1β、COX-2、iNOS mRNA表达(P<0.05,P<0.01),升高PPAR-γmRNA表达(P<0.05),降低P65、IκBα蛋白磷酸化和NLRP3蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论白花前胡甲素可能是通过抑制NF-κB信号通路活化并降低NLRP3炎症小体的表达,发挥抗炎和止咳作用,从而改善咳嗽变异性哮喘,是苏黄止咳胶囊的主要止咳功效成分之一。