miR-519e-5p靶向ANXA5对脊索瘤U-CH1细胞生物学行为的影响OACSTPCD

目的探讨miR-519e-5p靶向膜联蛋白A5(ANXA5)对脊索瘤U-CH1细胞生物学行为的影响。方法以qRT-PCR测定人脊索瘤组织和癌旁组织中miR-519e-5p和ANXA5的表达。体外培养U-CH1细胞,并分为miR-519e-5p mimics组、miR-519e-5p mimics阴性对照+空载组、miR-519e-5p mimics+ANXA5过表达组、对照组。平板集落形成实验、MTT实验检测各组U-CH1细胞增殖;流式细胞术检测各组U-CH1细胞凋亡;划痕实验、Transwell实验分别检测各组U-CH1细胞迁移与侵袭;Western blot检测各组U-CH1细胞ANXA5蛋白、凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax)及迁移上皮-间充质转化相关蛋白(Claudin-1、Vimentin、E-cadherin)表达;qRT-PCR法检测各组U-CH1细胞miR-519e-5p及ANXA5 mRNA表达;双荧光素酶报告基因实验检验miR-519e-5p与ANXA5在U-CH1细胞中的相互作用。结果与癌旁组织相比,脊索瘤组织miR-519e-5p表达降低(P<0.05),ANXA5 mRNA表达升高(P<0.05)。与对照组相比,miR-519e-5p mimics组细胞增殖率、集落生成率、迁移率、侵袭数、ANXA5 mRNA及ANXA5、Bcl-2、Claudin-1、Vimentin蛋白表达降低(P<0.05),miR-519e-5p mRNA表达、凋亡率及Bax、E-cadherin蛋白表达增高(P<0.05)。与miR-519e-5p mimics组相比,miR-519e-5p mimics+ANXA5过表达组细胞集落生成率、增殖率、侵袭数、迁移率、ANXA5 mRNA及ANXA5、Bcl-2、Vimentin、Claudin-1蛋白表达升高(P<0.05),凋亡率及Bax、E-cadherin蛋白表达下降(P<0.05)。miR-519e-5p可靶向下调U-CH1细胞中ANXA5表达。结论miR-519e-5p通过靶向抑制ANXA5表达降低脊索瘤U-CH1细胞迁移、增殖和侵袭活力,促进其凋亡。