冬凌草素诱导非小细胞肺癌细胞凋亡的作用及机制研究OA北大核心CSTPCD

研究冬凌草素对非小细胞肺癌(A549、H1299)细胞增殖、凋亡及自噬效用,并明确其潜在的作用机制。使用不同浓度冬凌草素分别干预A549、H1299细胞,采用CCK8(cell counting kit-8)检测细胞活性,筛选最佳的药效浓度;以10、50μg/mL冬凌草素及顺铂5μg/mL分别干预A549、H1299细胞24 h,流式细胞计数观察冬凌草素对A549、H1299细胞凋亡的影响,蛋白质印迹(Western blot,WB)检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3剪切体(Cleaved-Caspase3)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase9)、微管相关蛋白轻链3I(microtubule-associated protein light chain 3 isoform I,LC3I)、微管相关蛋白轻链3II(microtubule-associated protein light chain 3 isoform II,LC3II)、Bax、p62、Beclin-1表达;A549细胞过表达Beclin-1并用50μg/mL冬凌草素干预,WB检测Beclin-1相关蛋白。冬凌草素浓度依赖性抑制A549及H1299细胞增殖(P<0.05),IC 50值分别为38.2、46.6μg/mL;冬凌草素可增强A549、H1299细胞中Bax、Cleaved-Caspase3、Caspase3、Caspase9、p62蛋白表达(P<0.05);抑制A549、H1299细胞中LC3-I、LC3-II、Beclin-1蛋白表达(P<0.05);冬凌草素能减少过表达Beclin-1非小细胞肺癌细胞中Beclin-1、LC3-II、p62蛋白表达(P<0.05)。冬凌草素可抑制非小细胞肺癌细胞体外活性,可能与其抑制Beclin-1蛋白表达减少自噬而诱发细胞凋亡有关。