荔枝LcWRKY47基因的克隆、亚细胞定位、表达及延缓果实褐变的功能初探OA北大核心CSTPCD

荔枝(Litchi chinensis Sonn.)是亚热带地区重要的经济作物之一,但荔枝采后难贮存、易褐变,是目前保鲜过程中存在的最大问题之一。WRKY家族是植物中常见的一类转录因子,主要调控植物的逆境胁迫响应以及成熟衰老等生理过程。为了探究WRKY对采后荔枝果实成熟衰老的影响,本研究以妃子笑荔枝为试验对象,克隆LcWRKY47基因,长度为1077 bp;LcWRKY47编码的蛋白中含有WRKY保守结构域,二级结构以无规则卷曲为主,占比65.64%,三级结构主要为无规则卷曲和α-螺旋。通过motif分析及多序列比对,发现LcWRKY47蛋白属于第Ⅱ类WRKY转录因子;系统进化分析树表明荔枝LcWRKY47与同为无患子科的龙眼DlWRKY47亲缘关系最近;亚细胞定位试验表明,LcWRKY47蛋白定位在细胞核中;RT-qPCR分析表明,2mmol/L草酸处理后LcWRKY47基因在荔枝果皮和果肉中的表达趋势相同,均先升后降,后期处理组表达量均显著高于对照组,推测草酸处理后该转录因子在荔枝果实成熟衰老过程中起正调控作用。过表达LcWRKY47基因发现,转基因果实中LcWRKY47的表达量显著高于对照果实,且转基因荔枝衰老褐变情况明显优于处理组。综上推测,LcWRKY47转录因子可能在荔枝衰老与褐变过程中起着调节作用。