核酸检测试剂盒检测一致性评估体系构建初探OACSTPCD

目的对某血液核酸检测试剂盒检测的性能进行评估,构建一致性评估体系,分析检测结果的影响因素。方法收集本站无偿献血者标本18644份,ELISA检测剔除乙肝表面抗原(HBsAg)双阳性标本189份,分别采用考核试剂与对照试剂(Roche公司)对18455份标本进行HBV DNA平行检测,结果不符的标本采用第三方试剂(Grifols公司,HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA单检灵敏度分别为4.5 IU/mL、2.4 IU/mL、17.3 IU/mL,明显优于其他同类试剂,故将其作为确证试剂)进行确证,比较2种方法之间的一致性。结果本研究中均未检测到HCV RNA、HIV RNA阳性的标本。18455份标本初次检测中,考核试剂与对照试剂检测结果一致的阳性标本有12份,结果一致的阴性标本有18378份,结果不一致的标本有65份,阳性符合率为85.17%,阴性符合率为99.66%,2种试剂的符合率为99.65%。为了进一步明确65份不一致的标本的真实感染情况,采用乙肝5项定性和核酸单检的方法对其进行检测,综合乙肝三系和核酸检测结果进行对感染状态进行综合评定,结果显示,考核试剂与对照试剂检测结果一致的阳性标本有60份,结果一致的阴性标本有18371份,结果不一致的标本有24份,阳性符合率为86.96%,阴性符合率为99.92%,2种试剂的符合率为99.87%。计算Kappa值为0.83、约登指数(Youden指数)为0.40。以假阳性率(1-特异性)为横坐标,以真阳性率(灵敏度)为纵坐标绘制ROC曲线,ROC曲线下面积为0.705。选取189份HBsAg双阳性标本进行一致性检测,对考核试剂和对照试剂的检测Ct值作相关性分析和线性拟合,相关系数r=0.972。以考核试剂与对照试剂定量值的对数值均值为横坐标、差值为纵坐标构建Bland-Altman模型,有96.30%的考核试剂的差分值位于置信区间内。结论通过构建一致性评估体系,认为考核试剂与对照试剂在检测效能上相仿,适用于血液HBV DNA的常规筛查工作,能够有效保障血源筛查的安全性及有效性。