加味补肾壮筋汤对兔膝骨关节炎Wnt/β-catenin信号通路的影响OACSTPCD

目的:基于Wnt/β-catenin信号通路探讨加味补肾壮筋汤(modified Bushen Zhuangjin decoction,MBZD)治疗兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的作用机制。方法:从36只大耳白兔中随机选取8只作为对照组(Control),其余白兔在右膝关节注射木瓜蛋白酶以建立KOA模型。将造模成功的白兔随机分为模型组(KOA)、加味补肾壮筋汤组(MBZD,3.29 g·kg^(-1))及塞来昔布组(celecoxib,CELE,9.33 mg·kg^(-1)),每组8只。MBZD和CELE组白兔按照相应剂量灌胃,Control和KOA组白兔给予等体积生理盐水,每日1次,连续28 d。取右侧膝关节进行Pelletier评分,HE染色观察软骨与滑膜组织病理形态,免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测软骨与滑膜组织中基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)、Ⅱ型胶原α1(collagen typeⅡalpha 1,COL2A1)表达水平,Western blot法检测软骨组织中白细胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)、MMP-13、COL2A1、Wnt-3a、β-catenin、C-MYC蛋白表达水平,RT-qPCR法检测软骨组织中Wnt-3αmRNA、β-catenin mRNA、C-MYC mRNA表达水平。结果:与Control组比较,KOA组白兔Pelletier评分升高(P<0.05);与KOA组比较,MBZD组和CELE组白兔Pelletier评分降低(P<0.05)。HE染色显示,Control组白兔软骨和滑膜组织形态无明显异常。KOA组白兔软骨严重缺损,滑膜组织异常增生伴炎症细胞浸润。MBZD组和CELE组白兔软骨和滑膜组织损伤明显改善。IHC显示,与Control组比较,KOA组白兔软骨和滑膜组织MMP-13表达水平升高、COL2A1表达水平降低(P<0.05),经MBZD和CELE治疗后得到逆转(P<0.05)。Western blot显示,与Control组比较,KOA组白兔软骨组织IL-1β、MMP-13、Wnt-3α、β-catenin、C-MYC蛋白表达水平升高,COL2A1蛋白表达水平降低(P<0.05),经MBZD和CELE治疗后得到逆转(P<0.05)。RT-qPCR显示,与Control组比较,KOA组白兔软骨组织Wnt-3αmRNA、β-catenin mRNA、C-MYC mRNA水平升高,经MBZD和CELE治疗后得到逆转(P<0.05)。结论:MBZD可改善KOA白兔膝关节炎症反应和软骨细胞退变,其机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路有关。