芍药苷调节RIP1/RIP3/MLKL信号通路对慢性结肠炎大鼠坏死性凋亡的影响OACSTPCD

目的:探究芍药苷(PAE)调节受体相互作用蛋白1(RIP1)/受体相互作用蛋白3(RIP3)/混合系激酶区域样蛋白(MLKL)信号通路对慢性结肠炎大鼠坏死性凋亡的影响。方法:取健康SD大鼠随机分组,每组6只,包括对照组(Control组)、模型组(Model组)、药物低、中、高剂量灌胃7d处理组(1.25g·kg^(-1)·d^(-1)PAE-L组、2.5g·kg^(-1)·d^(-1)PAE-M组、5g·kg^(-1)·d^(-1)PAE-H组)和高剂量芍药苷灌胃7d+尾静脉注射7d RIP1激活剂组(5g·kg^(-1)·d^(-1)PAE-H+1.5mg·kg^(-1)·d^(-1)Z-VAD-fmk组)。建立慢性结肠炎模型,造模成功后,大鼠眼眶采血,取其结肠黏膜组织,用HE染色观察结肠组织形态;分析结肠黏膜组织损伤指数(CMDI)评分;用TUNEL检测试剂盒检测结肠组织细胞凋亡;用免疫组化检测结肠组织中基质金属蛋白酶(MMP-1、MMP-2)表达;用ELISA法检测大鼠血清炎症因子(IL-6、TNF-α)水平;用免疫印迹法检测结肠组织中RIP1/RIP3/MLKL通路蛋白表达。结果:与Control组相比,Model组结肠黏膜组织糜烂、水肿,出现炎性细胞浸润,CMDI评分、细胞凋亡率、IL-6、TNF-α水平上升,MMP-1、MMP-2、p-RIP1/RIP1、p-RIP3/RIP3、p-MLKL/MLKL蛋白表达上调(P<0.05);与Model组比较,PAE-L、PAE-M、PAE-H组结肠黏膜组织炎症细胞浸润逐渐减少,CMDI评分、细胞凋亡率、IL-6、TNF-α水平降低,MMP-1、MMP-2、p-RIP1/RIP1、p-RIP3/RIP3、p-MLKL/MLKL蛋白表达下调(P<0.05);与PAE-H组相比,PAE-H+Z-VAD-fmk组结肠黏膜组织炎症加重,CMDI评分、细胞凋亡率、IL-6、TNF-α水平升高,MMP-1、MMP-2、p-RIP1/RIP1、p-RIP3/RIP3、p-MLKL/MLKL蛋白表达上调(P<0.05)。结论:芍药苷能够抑制RIP1/RIP3/MLKL信号通路缓解慢性结肠炎大鼠坏死性凋亡。