敲低微小RNA-421对食管癌细胞的影响及其机制实验研究OACSTPCD

目的:探讨敲低微小RNA(miR)-421对食管癌细胞的影响及其可能的机制。方法:将人食管癌OE19细胞分为Con组(无处理)、inhibitor NC组(转染inhibitor NC至OE19细胞)、miR-421 inhibitor组(转染miR-421 inhibitor至OE19细胞)、miR-421 inhibitor+Y组[转染miR-421 inhibitor至OE19细胞+30μmol/L磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路抑制剂LY294002]和miR-421 inhibitor+A组(转染miR-421 inhibitor至OE19细胞+10μmol/L PI3K/AKT通路激活剂SC79),干预24 h。采用RT-qPCR法检测OE19细胞miR-421表达。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测OE19细胞增殖活力。采用Transwell实验检测OE19细胞迁移和侵袭能力。采用Western blot检测OE19细胞EMT相关标志物及PI3K/AKT通路相关蛋白表达。结果:与inhibitor NC组比较,miR-421 inhibitor组miR-421表达水平降低(P<0.05),表明miR-421 inhibitor转染成功。与inhibitor NC组比较,miR-421 inhibitor组细胞增殖活力、迁移细胞数、侵袭细胞数、N-钙黏蛋白(N-cadherin)以及波形蛋白(Vimentin)表达量、p-AKT/AKT及p-PI3K/PI3K比值降低,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达量升高(均P<0.05)。与miR-421 inhibitor组比较,miR-421 inhibitor+Y组增强了miR-421 inhibitor对OE19细胞的上述作用,miR-421 inhibitor+A组削弱了miR-421 inhibitor对OE19细胞的上述作用(均P<0.05)。结论:敲低miR-421可能通过下调PI3K/AKT信号通路抑制食管癌细胞的增殖、迁移、侵袭及EMT进程。