裸燕麦成熟胚组织培养体系的优化及创伤胚转化体系的初探OA

对8个裸燕麦品种的成熟胚进行诱导愈伤和分化培养,选用出愈率最高的品种裸燕麦1号,进一步对培养基进行优化。结果表明:在ML2诱导培养基中裸燕麦1号出愈率为87.33%,在DM1分化培养基中分化率较高。最佳培养体系为:使用ML2诱导培养基诱导愈伤,约15 d后进行继代培养,继代2次后转移至DM1分化培养基,待分化出叶片后转移至生根培养基。通过农杆菌介导法,使用带有绿色荧光蛋白GFP基因的pBI121质粒对裸燕麦1号创伤胚进行侵染,探究菌液浓度、选择剂浓度及移栽时间对转化率的影响。结果表明,裸燕麦创伤胚转化高效组合培养体系包括:农杆菌菌液OD600为0.8时进行侵染,卡那霉素选择剂的最适浓度为40 mg/L,创伤胚转化培养10 d后进行移栽。本试验以农杆菌侵染裸燕麦创伤胚建立的遗传转化体系具有可行性,为以后裸燕麦再生体系建立提供借鉴。