乳酸抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的研究OA北大核心CSTPCD

目的探究乳酸对心肌成纤维细胞的纤维化表型的调节作用和可能机制。方法小鼠心肌成纤维细胞分为对照组(常规培养)、低剂量实验组(4 mmol·L^(-1)L-乳酸)、中剂量实验组(8 mmol·L^(-1)L-乳酸)、高剂量实验组(12 mmol·L^(-1)L-乳酸)、转化生长因子-β1(TGF-β1)组(10 ng·mL^(-1)TGF-β1)、联合组(10 ng·mL^(-1)TGF-β1+12 mmol·L^(-1)L-乳酸)和乳酸转运蛋白抑制药(CHC)组(3 mmol·L^(-1)CHC)。用蛋白质印迹法检测纤维化相关蛋白的表达水平以及泛乳酸化修饰(Pan Kla)和H3组蛋白K18位乳酸化修饰情况,用细胞划痕实验检测细胞的迁移能力。结果对照组、TGF-β1组、高剂量实验组和联合组的细胞迁移率分别为(40.56±0.03)%、(61.61±0.04)%、(26.59±0.05)%和(38.33±0.06)%,TGF-β1组、高剂量实验组的细胞迁移率和对照组相比较,TGF-β1组的细胞迁移率和联合组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.01)。对照组、TGF-β1组、高剂量实验组、联合组的Ⅰ型胶原A1(COL1A1)蛋白相对表达水平分别为0.76±0.09、1.10±0.07、0.40±0.04和0.68±0.10,COL3A1蛋白相对表达水平分别为0.87±0.05、1.15±0.07、0.32±0.07和0.73±0.06,α-平滑肌肌动(α-SMA)蛋白相对表达水平分别为0.86±0.04、1.24±0.09、0.30±0.05和0.74±0.08,TGF-β1组、高剂量实验组的上述指标和对照组比较,TGF-β1组的上述指标和联合组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.01)。对照组、高剂量实验组和CHC组小鼠心肌成纤维细胞的细胞迁移率分别为(62.60±6.50)%、(28.00±8.15)%和(39.40±4.50)%,COL1A1蛋白相对表达水平分别为1.10±0.07、0.49±0.04和0.34±0.06,COL3A1蛋白相对表达水平分别为1.04±0.10、0.60±0.20和0.37±0.03,α-SMA蛋白相对表达水平分别为1.20±0.11、0.67±0.20和0.48±0.18,Pan Kla蛋白修饰水平分别为1.06±0.07、1.54±0.09和1.53±0.12,H3K18la蛋白修饰水平分别为0.67±0.06、1.23±0.06和1.14±0.08,CHC组和高剂量实验组的上述指标与对照组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论L-乳酸可能通过增加非组蛋白乳酸化修饰和H3K18la修饰来发挥抑制小鼠心肌成纤维细胞纤维化表型的作用。