川续断毛状根诱导条件研究OA

以川续断无菌苗的叶片为材料,研究不同农杆菌菌株种类、菌液浓度、侵染时间、外植体放置方式和共培养时间对川续断毛状根诱导率的影响,以筛选适合川续断毛状根生长的最佳培养条件,建立川续断毛状根诱导体系.川续断无菌苗植株培养结果显示,1.5 mg/L 6-BA处理的川续断种子发芽率高达64.0%,明显高于1.0 mg/L 6-BA处理(43.0%).除发根农杆菌R1000外,川续断叶片均能被发根农杆菌LBA9402、ATCC15834、ACCC10060诱导长出毛状根,其中诱导效果最好的是ACCC10060,菌液浓度以OD600值为0.6时诱导效果最好,侵染时间为10 min时诱导效果最佳,外植体表皮向下放置方式的诱导率高于表皮向上放置,共培养时间为2d时,川续断毛状根的诱导率最高,诱导后约15d出根.PCR分子鉴定结果显示,农杆菌质粒T-DNA已整合到川续断核基因中.可见,农杆菌菌株可以诱导川续断毛状根,可为川续断有效药效成分的大规模生产提供保障.