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非洲猪瘟病毒p30和pK205R双抗原间接ELISA检测方法的建立

何佳依 贾红 郑龙三 吴晓东 冯志新 钱莺娟 邹艳丽 王燕 刘珊 苗雨润 任炜杰 王振忠 白昀 陈欢

中国兽医科学2024,Vol.54Issue(11):1443-1450,8.
中国兽医科学2024,Vol.54Issue(11):1443-1450,8.DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2024.0180

非洲猪瘟病毒p30和pK205R双抗原间接ELISA检测方法的建立

Establishment of indirect ELISA based on p30 and pK205R dual-proteins for detection of African swine fever virus

何佳依 1贾红 2郑龙三 1吴晓东 3冯志新 4钱莺娟 1邹艳丽 3王燕 5刘珊 3苗雨润 1任炜杰 3王振忠 6白昀 4陈欢1

作者信息

  • 1. 南京农业大学动物医学院教育部动物健康与食品安全国际合作联合实验室农业部动物细菌学重点实验室,江苏南京 210095
  • 2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100193
  • 3. 中国动物卫生与流行病学中心 国家非洲猪瘟参考实验室,山东青岛 266032
  • 4. 江苏省农业科学院兽医研究所,江苏南京 210014
  • 5. 南京农业大学动物医学院教育部动物健康与食品安全国际合作联合实验室农业部动物细菌学重点实验室,江苏南京 210095||江苏省农业科学院兽医研究所,江苏南京 210014
  • 6. 南京农业大学动物医学院教育部动物健康与食品安全国际合作联合实验室农业部动物细菌学重点实验室,江苏南京 210095||中国动物卫生与流行病学中心 国家非洲猪瘟参考实验室,山东青岛 266032
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摘要

Abstract

In order to develop a reliable and rapid serological detection method,a dual-antigens indirect ELISA was established with structural protein p30 and non-structural protein pK205R of African swine fever virus(ASFV)as diagnostic antigens for the detection of ASFV antibodies.The results showed that the method had no cross-reactivity with positive sera of common swine-origin pathogens,such as pseudorabies virus,classical swine fever virus,Mycoplasma hyopneumoniae,porcine circovirus and porcine reproductive and respiratory syndrome virus.The sensitivity to ASF positive serum reached 1∶12 800.The coefficient of variation of intra-batch was 7.95%and the coefficient of variation of inter-batch repeatability was 9.18%,both less than 10%.Total 130 clinical pig serum samples were tested by the method and a ID.vet commercial ELISA kit,the positive conformity rate reached 92.19%,the negative conformity rate reached 86.36%,and the total conformity rate reached 89.23%.In summary,this study successfully established an ASFV p30 and pK205R dual-antigens indirect ELISA,which provided a new technical support for the detection of ASFV-specific antibodies in pig serum.

关键词

非洲猪瘟病毒/p30蛋白/pK205R蛋白/间接ELISA

Key words

African swine fever virus/p30/pK205R/indirect ELISA

分类

农业科技

引用本文复制引用

何佳依,贾红,郑龙三,吴晓东,冯志新,钱莺娟,邹艳丽,王燕,刘珊,苗雨润,任炜杰,王振忠,白昀,陈欢..非洲猪瘟病毒p30和pK205R双抗原间接ELISA检测方法的建立[J].中国兽医科学,2024,54(11):1443-1450,8.

基金项目

"十四五"国家重点研发计划项目(2021YFD1801200,2022YFD1800500) (2021YFD1801200,2022YFD1800500)

国家重点研发计划政府间国际科技创新合作重点专项(2019YFE0107300) (2019YFE0107300)

江苏省重点研发计划(现代农业)重点项目(SBE2020310346) (现代农业)

中国兽医科学

OA北大核心CSTPCD

1673-4696

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