膈下逐瘀汤抑制铁死亡干预代谢相关脂肪性肝病的作用机制OA北大核心CSTPCD

目的基于铁死亡角度探讨膈下逐瘀汤干预代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)的潜在作用机制。方法借助网络药理学方法,筛选膈下逐瘀汤干预MAFLD铁死亡的中心靶点,并进行基因本体、京都基因和基因组数据库富集分析和分子对接。将发育正常的受精后3d的斑马鱼幼鱼随机分为对照组、模型组(5mmol/L硫代乙酰胺)、异甘草酸镁组(阳性对照,5mg/mL)和膈下逐瘀汤低、中、高质量浓度组(20、40、80μg/mL,以生药量计),培养72h后检测其体内丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、活性氧(ROS)、铁离子(Fe^(2+))含量,观察其肝组织细胞结构和肝脏脂肪变性情况,检测其沉默信息调节因子1(SIRT1)、核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白的表达水平。结果膈下逐瘀汤潜在活性成分作用于MAFLD铁死亡的8个中心靶点包括肿瘤蛋白p53、SIRT1、Nrf2等;其富集于RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正/负向调控等生物过程,细胞核、细胞质等细胞成分,蛋白质结合等分子功能,以及铁死亡、癌症途径等信号通路,且可与主要活性成分紧密结合。与模型组比较,各药物组斑马鱼幼鱼体内ALT、AST、TC、TG、MDA、ROS、Fe^(2+)含量均显著降低,SOD、GSH含量均显著升高(P<0.05),其肝组织细胞病理损伤情况均有所改善、肝脏脂质蓄积均有所减少,SIRT1、Nrf2、GPX4蛋白的表达均显著上调(P<0.05)。结论膈下逐瘀汤可调节MAFLD模型斑马鱼幼鱼的脂质代谢,改善其氧化应激水平,维持其体内Fe^(2+)稳态,抑制其铁死亡进程,上述作用可能与激活SIRT1/Nrf2/GPX4轴有关。