咖啡因通过肺组织自噬对高氧致新生鼠支气管肺发育不良的影响研究OACSTPCD

目的探讨咖啡因对高氧致新生大鼠支气管肺发育不良(BPD)的影响及其作用机制。方法将48只SD新生大鼠按随机数字表法分为空气组、高氧组、空气+咖啡因组、高氧+咖啡因组,每组12只。除空气组外,其余3组构建BPD模型,空气+咖啡因组和高氧+咖啡因组腹腔注射20 mg/kg咖啡因,第7、14天收集大鼠肺组织。HE染色评估4组大鼠肺组织形态学变化,免疫组化法检测肺组织CD31蛋白平均光密度(AOD)值,qRT-PCR法检测肺组织CD31、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、p62 mRNA相对表达量,免疫荧光法检测肺组织LC3B、p62蛋白免疫荧光强度,Western blot法检测肺组织LC3B-Ⅱ和LC3B-Ⅰ蛋白比值(LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ)、p62蛋白相对表达量。结果出生后第7、14天,与空气组相比,高氧组大鼠肺泡辐射状计数(RAC)值显著降低,平均内衬间隔(MLI)值显著增加,肺组织CD31蛋白AOD值、CD31 mRNA相对表达量显著降低,LC3B mRNA相对表达量、LC3B蛋白免疫荧光强度、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ显著下降,p62 mRNA相对表达量、p62蛋白免疫荧光强度、p62蛋白相对表达量显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);与高氧组相比,高氧+咖啡因组大鼠肺泡RAC值显著升高、MLI值显著减少,肺组织CD31蛋白AOD值、CD31 mRNA相对表达量显著升高,LC3B mRNA相对表达量、LC3B蛋白免疫荧光强度及LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ显著升高,p62 mRNA相对表达量、p62蛋白免疫荧光强度、p62蛋白相对表达量显著下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论高氧致BPD大鼠肺组织自噬不足,咖啡因干预可改善BPD新生大鼠肺组织自噬及肺发育受阻,这为咖啡因治疗BPD提供了新的理论依据。