猪圆环病毒2型PCR检测方法建立及检测限探讨OA

近年来,猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)在自然界中的流行毒株越来越多样,为更便捷地检测自然界中的猪圆环病毒,本研究建立了一种检测PCV2流行毒株感染的PCR方法,为PCV2流行病学调查提供技术支持。本研究根据GenBank中公开的PCV2全基因序列,设计特异引物,经过构建阳性质粒、灵敏度试验、特异性试验,建立了PCR检测方法。结果显示,建立的PCR方法检测极限为500 copies/μL,以猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪塞内卡病毒、猪盖塔病毒、猪流行性腹泻病毒、猪伪狂犬病病毒和猪圆环病病毒3型的cDNA/DNA作为模板,用该方法扩增的猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪塞内卡病毒、猪盖塔病毒、猪流行性腹泻病毒、猪伪狂犬病病毒和猪圆环病病毒3型等的结果均为阴性,表明建立的方法特异性良好;应用该方法检测了疑似猪圆环病毒组织样品279份,检测到猪圆环病毒2型阳性样品118份,PCV2的阳性率为42.29%。本研究成功建立了检测PCV2感染的PCR方法,为进一步流行病学调查和生物学特性研究奠定了基础。