天王补心丹通过调节生物钟反馈环路治疗失眠的作用机制OA

目的:探讨天王补心丹通过调节生物钟反馈环路治疗失眠的作用机制。方法:40只SD大鼠分为正常组、模型组、天王补心丹低、高剂量组,每组10只。除正常组外,其他各组腹腔注射4-氯-DL-苯丙氨酸(PCPA)2 d构建失眠大鼠模型。造模后天王补心丹组分别予以低剂量(2.2 g·kg^(-1)·d^(-1))、高剂量(8.7 g·kg^(-1)·d^(-1))灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃,共7 d。采用翻正实验检测模型制备是否成功。干预第3天采用Morris水迷宫测试。干预第7天进行旷场实验。Western Blot法检测下丘脑组织中时钟基因蛋白Clock、Bmal1、Per1、Cry2表达水平。q-PCR检测下丘脑组织中Clock、Bmal1、Per1、Cry2 mRNA相对表达水平。结果:(1)翻正实验中,与正常组比较,模型组睡眠潜伏期延长,且睡眠时长缩短(P<0.05)。(2)Morris水迷宫实验中,与正常组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长(P<0.05),穿越逃生平台次数减少(P<0.05);与模型组比较,天王补心丹各剂量组逃避潜伏期均下降,穿越逃生平台次数增多(P<0.05)。(3)旷场实验中,与正常组比较,模型组大鼠中央网格活动路程与总活动路程减少(P<0.05);与模型组比较,天王补心丹各剂量组大鼠的中央网格活动路程与总活动路程明显增加(P<0.05)。(4)与正常组比较,模型组大鼠Clock、Bmal1蛋白表达量下降(P<0.05),Per1、Cry2蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,天王补心丹高剂量组Clock、Bmal1蛋白表达上调(P<0.05),天王补心丹低剂量组Bmal1蛋白表达上调(P<0.05),Clock表达呈上升趋势,各剂量组Per1、Cry2蛋白表达下降(P<0.05);(5)与正常组比较,模型组大鼠Clock、Bmal1 mRNA表达量下降(P<0.05),Per1、Cry2 mRNA表达量升高(P<0.05);与模型组比较,天王补心丹各剂量组大鼠下丘脑组织中Clock、Bmal1 mRNA表达量上调(P<0.05),Per1、Cry2 mRNA表达量有所下降(P<0.05)。结论:天王补心丹改善失眠大鼠的睡眠状态,其作用机制可能与调节时钟基因反馈环路有关。