基于GnRH及其受体介导下丘脑-垂体-卵巢轴探讨温和灸干预妇科寒凝血瘀证作用机制OA

目的观察温和灸“气海”“关元”“中极”对妇科寒凝血瘀证模型大鼠促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体的影响,探讨艾灸干预妇科寒凝血瘀证生殖功能的作用机制。方法将48只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸组、抑制剂组、抑制剂+艾灸组和激动剂组,每组8只。采用冰水浴+肾上腺素注射法制备妇科寒凝血瘀证模型,各干预组造模同时分别予GnRH抑制剂/激动剂注射及温和灸干预。对大鼠进行症状评分,激光散斑检测在体子宫微循环血流灌注量,HE染色观察卵巢、子宫组织形态,ELISA检测血清生殖激素GnRH、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及神经递质多巴胺(DA)、γ-氨基丁酸(GABA)含量,免疫组化染色、RT-qPCR、Western blot检测卵巢、子宫组织GnRH受体(GnRHR)、FSH受体(FSHR)、LH受体(LHR)mRNA和蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠症状评分明显升高,子宫微循环血流灌注量减少,卵泡减少,子宫内膜上皮变薄、结构混乱;血清GnRH、FSH、LH、GABA含量降低,DA含量升高;卵巢组织GnRHR、FSHR、LHR mRNA和蛋白表达下降(P<0.01)。与模型组比较,各干预组大鼠症状评分降低,子宫微循环血流灌注量增加,卵泡增多,子宫内膜增厚、腺体增多;血清GnRH、FSH、LH、GABA含量升高,DA含量降低;卵巢组织GnRHR、FSHR、LHR mRNA和蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论艾灸可通过调节神经递质调控GnRH及其受体,改善下丘脑-垂体-卵巢轴功能,从而改善妇科寒凝血瘀证模型大鼠一般状态,提高生殖功能。