博来霉素诱导小鼠实验性肺纤维化方法的优化OA北大核心CSTPCD

目的比较腰穿针气管内滴注及气溶胶气管内雾化两种不同方式,对博来霉素诱导小鼠肺纤维化模型的影响,以便探索出更佳的造模方法。方法将72只C57BL/6J小鼠按体重随机分为空白对照组、腰穿针模型组和气溶胶模型组,每组24只。空白对照组气管内滴注生理盐水,腰穿针模型组使用腰穿针气管内滴注博来霉素,气溶胶模型组使用肺部雾化给药装置气管内雾化喷入博来霉素;分别于造模后第14和21天检测小鼠的肺部影像学病变、组织病理学改变、羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)、Ⅰ型胶原(collogenⅠ,COLⅠ)表达水平和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达量,以评价各组小鼠肺纤维化程度。结果与空白对照组相比,腰穿针模型组和气溶胶模型组小鼠均精神萎靡、扎堆喜卧。与空白对照组相比,腰穿针模型组和气溶胶模型组在14和21 d,小鼠体重均显著下降(P<0.001)。Micro-CT扫描结果显示腰穿针模型组白色阴影围绕在气管周围,而气溶胶模型组白色阴影则分布更为弥散。肺组织肺泡炎及肺纤维化程度均以气溶胶模型组最高,且以21 d更为显著。腰穿针模型组和气溶胶模型组造模后14和21 d羟脯氨酸含量均显著升高(P<0.05),且21 d羟脯氨酸的增加更显著、更稳定(P<0.001)。腰穿针模型组和气溶胶模型组造模21 d后COLⅠ的表达均显著增加,且以气溶胶模型组更为显著(P<0.001)。α-SMA蛋白检测结果显示,腰穿针模型组和气溶胶模型组造模21 d后肺组织中α-SMA的蛋白表达量较空白对照组均明显升高(P<0.001),但两组间无显著性差异。结论综合多种因素,气溶胶气管内雾化法可以作为肺纤维化模型构建的优选方案。