丹皮酚对人神经母细胞瘤细胞帕金森病模型的保护作用及其初步机制OA北大核心

目的探究丹皮酚(PAE)对过表达α-突触核蛋白(α-Syn)诱导的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)损伤中自噬的影响及其相关作用机制。方法以SH-SY5Y细胞为对照组,含A53T-α-Syn突变的SH-SY5Y细胞为模型组、PAE(150μg/ml)组、3-甲基腺嘌呤(3-MA,1 mmol/L)组和PAE(150μg/ml)+3-MA(1 mmol/L)组。采用CCK-8法检测各组细胞存活率,光学显微镜下观察细胞形态,Western blotting检测α-Syn和自噬通路相关蛋白Beclin-1、p62、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、Bcl-2表达水平。结果与对照组比较,模型组细胞存活率明显降低(P<0.01),α-Syn蛋白表达水平明显增高(P<0.001),自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达水平明显降低(P<0.01或P<0.05),自噬底物蛋白p62蛋白表达水平升高(P<0.05),调节自噬通路相关蛋白p-JNK、Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,PAE组细胞存活率增高(P<0.01),α-Syn、p62蛋白表达水平降低(P<0.01或P<0.05),LC3-Ⅱ、Beclin-1、p-JNK、Bcl-2蛋白表达水平增高(P<0.05)。与PAE组比较,PAE+3-MA组细胞α-Syn蛋白表达水平增高(P<0.05)。结论PAE可缓解A53T-α-Syn突变诱导的SH-SY5Y细胞损伤,并通过激活自噬途径清除过表达的α-Syn,其机制可能与上调JNK/Bcl-2介导的自噬途径有关。