鹅源芽孢杆菌和乳酸菌耐药基因及生物学特性分析OA北大核心

[目的]研究从鹅肠道分离出的8株潜在益生菌的生物学特性,为后续合理开发和利用菌株提供参考。[方法]通过形态学观察、生化鉴定、PCR鉴定、16S rRNA基因测序对菌株进行鉴定。通过菌株产酸性能、最适生长温度、耐酸性能、耐胆盐性能、抑菌活性、产酶性能等试验对菌株进行生物学特性检测。通过药敏试验和耐药基因检测分析菌株耐药情况。[结果]将从鹅肠道分离的8株菌分别命名为A1~A5和X1~X3。通过形态学观察、生化鉴定初步判断菌株A1~A5为芽孢杆菌,菌株X1~X3为乳酸菌。分离株16S rRNA基因PCR扩增均获得大小约为1 500 bp的条带。16S rRNA基因序列相似性比对结果鉴定菌株A1、A2为枯草芽孢杆菌,菌株A3~A5分别为贝莱斯芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌,菌株X1~X3分别为发酵乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和副干酪乳杆菌。产酸性能结果显示,菌株X1~X3具有较强的产酸性能,菌株X1产酸性能最好,36 h时pH可达到3.84。8株菌最适生长温度均为37℃。耐酸耐胆盐性能试验结果显示,8株菌均具有良好的耐受性,其中菌株A2耐受性最好,当pH为4.0,胆盐浓度为0.9%时,存活率可达70%以上。抑菌试验结果显示,8株菌均具有良好的抑菌效果,抑菌圈直径均在10.00 mm以上,其中菌株A2抑菌性最强。产酶性能试验结果显示,菌株A1~A5具有较强的产酶性能,菌株A2产酶效果最好,淀粉酶圈直径可达15.5 mm,纤维素酶圈直径可达14.3 mm。药敏试验结果显示,8株菌对大部分抗菌药都保持中度以上敏感。耐药基因分析表明,四环素类基因TetA(25.0%)、喹诺酮类基因GyrA(12.5%)和大环内酯类基因ErmF(12.5%)为主要耐药基因,其中菌株A3携带四环素类基因TetA(480 bp),菌株A4菌株携带喹诺酮类基因GyrA(382 bp)和四环素类基因TetA(480 bp),菌株X1携带大环内酯类基因ErmF(306 bp)。[结论]从鹅肠道分离的8株菌中枯草芽孢杆菌A2有较强的益生性,具有作为鹅源微生态制剂的潜力。