猪丁型冠状病毒非结构蛋白NSP9和NSP16抑制IFN-Ⅰ的表达OA北大核心
Inhibition of IFN-Ⅰ production by nonstructural proteins NSP9 and NSP16 of porcine deltacoronavirus
为探究猪丁型冠状病毒(PDCoV)非结构蛋白NSP9和NSP16对宿主细胞Ⅰ型干扰素(IFN-Ⅰ)的调控作用,在293T细胞中过表达NSP9、NSP16,通过双荧光素酶报告系统和qRT-PCR评估NSP9、NSP16对仙台病毒(SeV)诱导产生的IFN-β的影响,再通过qRT-PCR、Western-blot检测NSP9、NSP16对RIG-Ⅰ样受体(RLRs)信号通路的影响.结果显示,NSP9、NSP16能显著抑制和降低SeV诱导的IFN-β启动子活性、IFN-β与干扰素刺激基因15(ISG15)的转录水平.同时,过表达NSP9可以显著降低RLRs信号通路中视黄酸诱导基因Ⅰ(RIG-Ⅰ)、黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)、TANK结合激酶1(TBK1)和干扰素调节因子3(IRF3)的转录水平,并显著抑制RIG-Ⅰ、MDA5、线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)和TBK1的表达;而过表达NSP16可以显著降低RIG-Ⅰ和MDA5的转录水平,并显著抑制RIG-Ⅰ的表达和IRF3的磷酸化.结果表明,PDCoV的非结构蛋白NSP9和NSP16可能通过调控RLRs信号通路来抑制IFN-Ⅰ产生,为阐明PDCoV的致病机制、寻找新的治疗靶点、开发新型抗病毒药物奠定了理论基础.
This study was to investigate the regulatory effect of porcine deltacoronavirus(PDCoV)nonstructural proteins NSP9 and NSP16 in the regulation of interferon-Ⅰ(IFN-Ⅰ)in host cells.NSP9 and NSP16 were overexpressed in 293T cells.The effects of NSP9 and NSP16 on Sendai virus(SeV)-induced IFNβ were assessed by dual luciferase reporter system and qRT-PCR and the RIG-Ⅰ-like receptors(RLRs)signaling pathway were detected through qRT-PCR and Western-blot.The results showed that NSP9 and NSP16 significantly inhibited and decreased SeV-induced IFN-β promoter activity,transcriptional levels of IFN-β and interferon stimulated gene 15(ISG15).Overexpression of NSP9 significantly reduced the transcriptional levels of retinoic acid-inducible gene Ⅰ(RIG-Ⅰ),Melanoma differentiation associated gene 5(MDA5),Tank-binding kinase 1(TBK1)and interferon regulatory factor 3(IRF3)in RLRs,and significantly inhibited the expression of RIG-Ⅰ,MDA5,MAVS and TBK1.Overexpression of NSP16 reduces the transcriptional levels of RIG-Ⅰ and MDA5,and significantly inhibits RIG-Ⅰ expression and IRF3 phosphorylation.The results indicate that NSP9 and NSP16 of PDCoV may inhibit IFN-Ⅰ production by regulating RLRs,and provide a theoretical basis for elucidating the pathogenic mechanism of PDCoV,searching for new therapeutic targets,and developing new antiviral drugs.
刘思雨;许艺兰;李斌;程珂;秦毅斌;赵硕;欧阳康;何颖;卢冰霞;赵武;段群棚;许心婷;全琛宇
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畜牧业
猪丁型冠状病毒NSP9蛋白NSP16蛋白Ⅰ型干扰素
porcine deltacoronavirusNSP9 proteinNSP16 proteintype Ⅰ interferon
《中国兽医科学》 2025 (1)
1-10,10
国家现代农业产业技术体系广西创新团队建设专项(nycytxgxcxtd-2023-15-02)南宁市科技重大专项(20232039)广西基本科研业务费专项(桂科专项23-3/22-4/22-3/24-7/24-3/24-11)广西兽医生物技术重点实验室开放基金项目(22-035-32-B-02,23-035-32-B-02,23-035-32-B-01)广西农业科技自筹经费项目(Z2023034,Z202225)广西桂垦牧业科学研究与技术开发项目(桂垦牧科2022004)
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