基于登革病毒噬菌体展示文库的E蛋白特异性纳米抗体的筛选与鉴定OA北大核心
登革病毒(DENV)是一种经伊蚊传播的人兽共患病毒,目前没有特异性抗DENV药物和安全且高效的疫苗。为制备可中和DENV的纳米抗体,本研究构建血清Ⅱ型DENV(DENV-2)特异性噬菌体展示文库,并筛选DENV E蛋白特异性纳米抗体。首先将灭活并浓缩的DENV-2免疫羊驼,采血分离外周血单核细胞(PBMC)并提取总RNA,通过RT-PCR扩增羊驼重链抗体可变区(VHH)并克隆入pCANTAB-5E质粒,构建成DENV特异性纳米抗体噬菌体展示文库,然后,以DENV-2 E蛋白为抗原淘筛纳米抗体库,将筛选到的2个VHH片段克隆入pPICZαA载体后在毕赤酵母(GS115株)中表达,并纯化抗体,最后,鉴定纯化的纳米抗体与E蛋白的反应性。结果显示:成功构建库容为9.1×10^(8)个的噬菌体展示文库;经3轮淘筛获得1株与DENV-2 E蛋白特异结合的纳米抗体DV2-Nb2。本研究为DENV诊断和抗体药物研发提供实验技术基础。
陈玲玲;范瑞文;何雷;贾琼;秦蓉芬;陈玉红;李雷斌;黄袁慧;刘玉良;李义平;王传彬
广西大学动物科学技术学院,南宁530004 中国动物疫病预防控制中心,北京102600山西农业大学动物医学学院,太谷030801广西大学动物科学技术学院,南宁530004山西农业大学动物医学学院,太谷030801山西农业大学动物医学学院,太谷030801广西大学动物科学技术学院,南宁530004广西大学动物科学技术学院,南宁530004广西大学动物科学技术学院,南宁530004中国动物疫病预防控制中心,北京102600中山大学中山医学院热带病防治研究教育部重点实验室,广州510080中国动物疫病预防控制中心,北京102600
医药卫生
血清Ⅱ型登革病毒E蛋白纳米抗体噬菌体展示
《中国动物传染病学报》 2025 (4)
P.170-176,7
中山大学热带病防治研究教育部重点实验室开放基金。
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