复方守宫散调控JAK2/STAT3信号通路抑制结直肠癌细胞增殖和迁移并诱导凋亡的机制研究OA

目的 探究复方守宫散抑制结直肠癌(colorectal cancer,CRC)HCT116和HT29细胞增殖和迁移并诱导凋亡的作用机制。方法 采用CCK-8法检测复方守宫散含药血清对HCT116和HT29细胞存活率的影响,并据此设置对照组及复方守宫散含药血清低、中、高剂量组进行后续实验;采用EdU染色检测细胞增殖水平,Hoechst33258染色检测细胞凋亡水平,Transwell实验检测细胞迁移能力;采用RT-qPCR检测Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)、信号传导及转录激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)mRNA表达水平;采用Western blot法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、上皮—间质转化标志物(Ecadherin、N-cadherin)、凋亡相关蛋白(cleaved caspase-3)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、O-连接β-N-乙酰葡萄糖胺(O-linked β-N acetylglucosamine,O-GlcNAc)及JAK2/STAT3信号通路关键蛋白表达水平。结果 CCK-8实验结果显示,复方守宫散显著抑制CRC细胞活力;Transwell实验和EdU染色结果显示,复方守宫散对CRC细胞迁移及增殖能力有显著抑制作用;Hoechst 33258实验结果显示,复方守宫散可诱导细胞凋亡;RT-qPCR实验结果显示,复方守宫散显著降低JAK2和STAT3mRNA表达水平;Western blot实验结果显示,复方守宫散显著升高E-cadherin和cleaved caspase-3蛋白表达水平,降低PCNA、MMP2、MMP9、N-cadherin、O-GlcNAc及JAK2/STAT3信号通路相关蛋白表达水平,且呈浓度依赖性。结论 复方守宫散能显著抑制HCT116、HT29细胞的增殖和迁移能力,并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与JAK2/STAT3信号通路有关。