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家蚕核型多角体病毒埃及株p10基因的克隆及结构特征分析CSCDCSTPCD
作者：姜丽华钟万芳蔡平钟徐兴耀阎文昭吴杰
发表期刊：农业生物技术学报 2003年5期
关键词：家蚕核型多角体病毒埃及株p10基因PCR序列分析
摘要：根据BmNPV T3株中p10基因侧翼保守序列设计一对特异性引物,以家蚕核型多角体病毒埃及株(Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus strain Egyptian,BmNPVEg)基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增得到p10基因(GenBank登录号:AF533970).扩增片段全长为877bp,含有1个213bp的开放阅读框(ORF)、编码70个氨基酸,推测其分子量为7.5kD.序列分析表…查看全部>>
gp64基因相应dsRNA对家蚕核型多角体病毒(BmNPV)增殖的抑制北大核心CSCDCSTPCD
作者：夏定国张国政王文兵赵巧玲唐顺明
发表期刊：中国农业科学 2007年12期
关键词：双链RNA家蚕核型多角体病毒gp64基因病毒滴度实时定量RT-PCR
摘要：[目的]研究gp64基因相对应的多个dsRNA对家蚕核型多角体病毒增殖的抑制效果.[方法]体外合成dsRNA,通过病毒滴度试验、实时定量RT-PCR法研究gp64基因的不同区域、不同长度与RNAi干扰效果的关系.[结果]供试的6个dsRNA的最大抑制效果相当(滴度TCID50的最大抑制差值为4.00左右);经RNAi的不同时间点的gp64 mRNA 表达水平均明显下调(P<0.01),其中48 h的gp64 mRNA的表达量约为…查看全部>>
丝裂霉素C和二甲基亚砜对家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的诱变北大核心CSCDCSTPCD
作者：曹阳黄自然葛慈斌刘良式王春新
发表期刊：昆虫学报 2000年1期
关键词：家蚕家蚕核型多角体病毒诱变丝裂霉素C二甲基亚砜
摘要：该文报道强诱变剂丝裂霉素C (MMC) 和化学溶剂二甲基亚砜 (DMSO) 在家蚕蛹体内对家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的诱变结果.MMC对BmNPV具有诱变效应:(1)导致蚕蛹发病时间延迟,发病死亡率下降,有显著的剂量效应;(2)部分病蛹体内发生异常形态多角体,继代试验证实具有遗传稳定性.其中具对角线裂痕的四角形超大多角体(15.0～30.0μm)尚属首次发现;(3)诱变的BmNPV多角体内部结构发生变化;(4)诱变的BmNPV-…查看全部>>
家蚕中肠组织抗核型多角体病毒病的相关蛋白分析北大核心CSCDCSTPCD
作者：刘晓勇陈克平姚勤李军蔡克亚
发表期刊：昆虫学报 2008年4期
关键词：家蚕中肠家蚕核型多角体病毒近等基因系二维电泳质谱
摘要：家蚕中肠上皮是病毒经口侵入遇到的第一个组织.昆虫幼虫抵御杆状病毒的感染,可通过选择性的使感染的中肠上皮细胞发生凋亡并在释放病毒粒子进入血淋巴之前使感染的细胞从中肠脱落.为研究家蚕抗核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)病的机制,通过对BmNPV高度抗性和高度敏感性的家蚕品系杂交和回交构建了近等基因系.本文对家蚕高抗,敏感及近等基因系5龄起蚕中肠组织的蛋白质表达谱进行了二维电泳(t…查看全部>>
利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中高效表达人胰岛素样生长因子-2(hIGF-2)北大核心CSCDCSTPCD
作者：
发表期刊：中国药科大学学报 2002年2期
关键词：人胰岛素样生长因子-2家蚕核型多角体病毒基因表达免疫学活性生物学活性
摘要：目的:研制有生物活性的可溶性分泌型重组人胰岛素样生长因子-2(rhIGF-2).方法:将14 kD hIGF-2前体cDNA基因插入家蚕核型多角体病毒(BmNPV)转移载体pBakPAK8中,经与野生型病毒DNA共转染家蚕细胞后,通过体内同源重组的方式获得重组病毒BmNPV/IGF-2.以BmNPV/IGF-2感染5龄家蚕幼虫,分别在感染后24,48,72,96,108,120 h提取家蚕血淋巴液,以ELISA法测定不同时象家蚕血中I…查看全部>>
家蚕抗BmNPV细胞因子的筛选和分析北大核心CSCDCSTPCD
作者：王菲李显扬化晓婷夏庆友
发表期刊：中国农业科学 2018年4期
关键词：家蚕家蚕核型多角体病毒BmRelish细胞因子抗病毒免疫
摘要：[目的]探讨家蚕NF-κB类转录因子BmRelish在抗核型多角体病毒(Bombyxmori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)感染的免疫应答中的作用,筛选和分析抗病毒细胞因子,完善对家蚕抗病毒免疫机制的认识.[方法]通过Western blot检测当BmNPV感染家蚕BmE细胞后BmRelish全长形式(BmRelish-FL)是否转变成其活性形式(BmRelishact);利用荧光定量PCR检测过表达BmRel…查看全部>>
BmNPV DNA解旋酶基因酵母双杂交诱饵载体的构建北大核心CSCDCSTPCD
作者：杨金宏王代钢卢从德孔卫青
发表期刊：山东农业大学学报（自然科学版） 2010年2期
关键词：家蚕核型多角体病毒DNA解旋酶诱饵载体自激活
摘要：为了筛选家蚕对BmNPV DNA解旋酶的受体基因,根据GenBank公布的BmNPV (T3株)的序列,设计引物对其DNA解旋酶基因的核心结构域进行PCR扩增,成功克隆该基因并利用双酶切亚克隆至酵母双杂交诱饵载体PGBKT7.实验证明重组诱饵载体不能自激活,可以作为诱饵进行蛋白结合试验.
病毒感染条件下家蚕ORC的表达变化北大核心CSCD
作者：杨慧鹏罗素娟李轶女张志芳沈桂芳张耀洲
发表期刊：生物技术通报 2010年9期
关键词：家蚕ORC表达趋势实时荧光定量PCR家蚕核型多角体病毒
摘要：DNA复制原点识剐复合体(origin recognition complex,ORC)识别并结合在DNA复制原点上,募集其他相关的复制因子组成复制前复舍体(pre-replication complex,pre-RC).ORC各个独立的亚基还具有非复制相关的功能.利用荧光定量PCR技术监测感染核型多角体病毒(BmNPV)后,家蚕五龄起蚕脂肪体组织中ORC各个亚基的表达的变化.在感染早期,ORC的拷贝数有所下降,随后表达量增加,并出现…查看全部>>
家蚕核型多角体病毒BmNPV囊膜蛋白P74膜外区克隆和原核表达北大核心CSCD
作者：李国辉唐琦胡朝阳陈慧卿
发表期刊：生物技术通报 2011年10期
关键词：家蚕核型多角体病毒p74基因P74蛋白原核表达抗体制备
摘要：通过PCR扩增家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)囊膜蛋白p74基因膜外区片段,对切胶纯化得到的DNA目的片段与原核表达载体pET28a进行连接,通过不同浓度的IPTG对含有pET28a-p74重组质粒的大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导,对诱导产物进行SDS-PAGE电泳.结果表明p74基因膜外区获得了表达；通过His单抗对原核表达产物进行Western blotting…查看全部>>
家蚕核型多角体病毒BmOrf99的研究
作者：张曦胡小龙薛仁宇曹广力贡成良
发表期刊：安徽农业科学 2015年21期
关键词：家蚕核型多角体病毒BmOrf99敲除BVODV
摘要：[目的]探讨家蚕核型多角体病毒BmOrf99在杆状病毒生命周期中的功能.[方法]运用Red同源重组技术构建BmOrf99缺失型重组病毒,研究BmOrf99对病毒复制、BV产生和病毒形态发生的影响.[结果]病毒转染细胞1.5h可检测到BmOrf99表达;通过Red重组系统构建敲除型病毒BmNPV-BmOrf99KO-polh-GFP,转染结果显示,敲除BmOrf99病毒仍能增殖复制,透射电镜观察显示,BmOrf99敲除对病毒粒子装配和多…查看全部>>

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