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从Hep-2细胞克隆hFGF-2 cDNA及序列分析北大核心
作者：王帮河何金生汪春兰赵宇汪红俊曹东升
发表期刊：安徽医科大学学报 2005年2期
关键词：成纤维细胞生长因子2克隆,分子序列分析,DNADNA,互补
摘要：目的从Hep-2细胞(人喉鳞癌细胞)克隆人的FGF-2 cDNA,用于下一步构建携带hFGF-2cDNA的非复制型腺病毒载体.方法设计和合成引物,提取Hep-2细胞的总mRNA,通过RT-PCR扩增出目的cDNA,然后将其重组到pGEM-T Easy载体中送测序分析.结果经基因测序分析表明,从 Hep-2细胞克隆的hFGF-2 基因序列与已报告的序列,除在ATG后的第24位碱基发生无意突变外(由G→A),其他序列则完全一致.结论…查看全部>>
新疆罗布诺尔地区铜器时代古代居民mtDNA多态性分析北大核心CSCDCSTPCD
作者：崔银秋许月杨亦代谢承志朱泓周慧
发表期刊：吉林大学学报（医学版） 2004年4期
关键词：DNA,线粒体序列分析,DNA多态现象(遗传学)
摘要：目的:通过新疆罗布诺尔地区铜器时代古代居民mtDNA多态性分析,探讨新疆境内古代欧洲人种成分的来源.方法:从孔雀河古墓沟墓地古代居民人骨中提取出古DNA.用4对套叠引物对线粒体基因组的调控区(363 bp)进行扩增、测序.结果:10个个体中具有10个DNA序列,系统发育分析表明罗布诺尔古代居民的核酸多样性及平均配对差异均与欧洲群体接近.结论:早在3800年前的铜器时代,罗布诺尔地区已有单一的欧洲人种构成的人群存在.
DNA自动测序中的常见影响因素及测序反应体系的优化北大核心CSCDCSTPCD
作者：许艳卫红飞胡小平包木胜王爱丽程岩王丽颖
发表期刊：吉林大学学报（医学版） 2004年6期
关键词：序列分析,DNADNA/分离和提纯电泳,毛细管成本及成本分析
摘要：目的:分析和研究DNA测序过程中影响因素及其测序反应体系的优化.方法:对DNA测序体系中模板、引物、测序产物的纯化及3种测序反应体系对测序结果的影响进行比较.结果:采用5 μL(含1 μL TRR)、5 μL(含2 μL TRR)和10 μL(含4 μL TRR)测序反应体系对同一质粒DNA进行测序,其可判读序列都能达到720 bp以上.结论:DNA自动测序的质量与模板的纯度、浓度、所用引物、测序反应体系及测序反应产物的纯化有直接的关…查看全部>>
提高石蜡包埋组织中提取DNA质量的实验研究北大核心CSCDCSTPCD
作者：盖宝东房学东金仲田张德恒郑泽霖
发表期刊：吉林大学学报（医学版） 2003年1期
关键词：石蜡包埋DNA/分离和提纯聚合酶链反应序列分析,DNA
摘要：目的:确定从石蜡包埋组织中提取DNA的最佳条件.方法:改变石蜡切片厚度、组织脱蜡时间、消化液蛋白酶K浓度、组织消化时间等参数,组合出96种不同提取DNA的条件,比较各种条件下所提取DNA的数量和质量.结果:各种条件均可以提取出一定数量的DNA,但有些条件所提取的DNA不适合于做PCR及DNA 序列测定.结论:从石蜡包埋组织中提取DNA的最佳条件为,10.0 μm组织切片;切片脱蜡2次,脱蜡时间分别为2 h和12 h;消化液…查看全部>>
PCR-RSSO基础上HLA-Ⅰ、Ⅱ基因分型的研究北大核心CSCDCSTPCD
作者：肖露露郝桂琴叶欣陈洪涛谭茵张升
发表期刊：第一军医大学学报 2003年1期
关键词：HLA抗原聚合酶链反应等位基因序列分析,DNA反向杂交序列特异性寡核苷酸
摘要：目的通过对PCR-DNA技术的分析,探讨人类白细胞抗原(HLA)基因分型方法.方法采用PCR反向序列特异性寡核苷酸(polymerase chain reaction-reverse sequence specific oligonucleotide,PCR-RSSO)杂交技术,建立改良半量扩增体系全自动HLA-Ⅰ、Ⅱ等位基因分型方法,进行了635份血液标本HLA-A、B、C、DR、DQ等位基因分型,其中166份DNA同时采用序列特异…查看全部>>
骨肉瘤p21 WAF1/CIP1基因DNA序列分析及其mRNA、p21蛋白表达北大核心CSCDCSTPCD
作者：张春林廖威明李佛保曾炳芳曾益新
发表期刊：中山大学学报（医学科学版） 2004年5期
关键词：p21 WAF1/CIP1基因骨肉瘤原位杂交聚合酶链反应单链构象多态性序列分析,DNA
摘要：[目的]通过检测骨肉瘤组织中p21 WAF1/CIP1基因的表达及其DNA序列变化,探讨它们与骨肉瘤生物学特性之间的关系及其对预后的评价.[方法]采用原位杂交及免疫组化法检测45例人骨肉瘤p21 WAF1/CIP1基因mRNA及p21蛋白的表达.采用PCR-SSCP方法检测骨肉瘤p21 WAF1/CIP1基因DNA变化.采用双脱氧核苷酸末端终止法进行DNA的直接测序.[结果]①p21蛋白表达阳性率在骨肉瘤中为18%(8/45);②p2…查看全部>>
四君子汤修复脾虚大鼠线粒体细胞色素氧化酶的作用及机制北大核心CSCDCSTPCD
作者：刘友章王昌俊周俊亮刘静刘兆周欧志穗金友
发表期刊：中国临床康复 2006年35期
关键词：脾虚四君子汤/治疗应用中药疗法电子传递复合物Ⅳ序列分析,DNA模型,动物
摘要：目的:运用灌服耗气破气中药联合饥饱失节复合因素建立脾虚大鼠模型,观察四君子汤对脾虚大鼠线粒体细胞色素含量及其氧化酶活性的影响.方法:实验于2004-04/2005-02在广州中医药大学第一附属医院内科实验室和广州中医药大学基础医学实验室完成.①选取清洁级1月龄SD大鼠40只,随机数字表法分成4组:正常组、脾虚模型组、自然复健组、四君子汤治疗组,10只/组.②除正常组以普通饲料进行常规喂养外,其余3组均建立脾虚模型.脾虚模型组隔日喂食,…查看全部>>
第2代测序技术诊断芬戈尔德菌假体周围感染1例报告CSCDCSTPCD
作者：董伊隆钱约男张侠蔡春元
发表期刊：中国骨伤 2021年2期
关键词：序列分析,DNA假体相关感染关节成形术,置换,膝
广东地区GBV-C/HGV5'NCR区序列变异的研究CSCDCSTPCD
作者：付涌水曹开源吕凌
发表期刊：广东医学 2000年5期
关键词：克隆,分子序列分析,DNA肝炎病毒组,庚型聚合酶链反应
摘要：目的了解广东地区GBV-C/HGV 5′NCR区的序列变异情况.方法以GBV-C和HGV的5′NCR区完全同源的序列设计合成引物用于套式RT-PCR.从广东地区的10例GBV-C/HGV感染者血中扩增了10个序列,分别克隆至pUC19或pT-Adv载体.以35 S标记的双脱氧链末端终止法对这10个序列分别进行正反两个方向的序列测定.结果 10株序列相互间同源性最大为100%,最小为84.4%.与Genbank所载3个标准株的相应序列比…查看全部>>
γ-干扰素基因pIRES改进型黄色荧光蛋白载体的构建北大核心CSCDCSTPCD
作者：蓝育青葛坚卓业鸿林明楷王金林刘海泉李艳艳
发表期刊：中山医科大学学报 2002年3期
关键词：干扰素Ⅱ型/遗传学黄色荧光蛋白遗传载体克隆,分子序列分析,DNA
摘要：[目的]构建携带γ-干扰素基因(ifn-γ)的pIRES改进型黄色荧光蛋白载体(pIRES-EYFPIFN-γ),为γ-干扰素基因的体内外表达及蛋白定位提供理想的标记.[方法]根据已知γ-干扰素基因序列,设计在目的片段两端分别带EcoRⅤ和NotⅠ酶切位点序列的2条引物,用PCR技术从质粒pcDNA3IFN-γ中扩增出ifn-γ(499 bp),PCR产物用EcoRⅤ和NotⅠ双酶切后回收纯化,定向克隆至商品质粒pIRES-EYFP,…查看全部>>

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