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含有RSV G蛋白片段和CTL表位融合蛋白的表达及纯化北大核心CSCD
作者：龚伟范昌发曾瑞红梅兴国
发表期刊：军事医学科学院院刊 2005年2期
关键词：呼吸道合胞病毒糖蛋白类CTL 表位原核表达蛋白纯化聚合酶链反应重组蛋白质类
摘要：目的:构建表达呼吸道合胞病毒(RSV)G蛋白片段(G126,来自100～225氨基酸)和来自RSV M2蛋白的CTL表位的原核表达质粒,探索适宜的表达和纯化条件,获得融合表达产物,为进行体内外实验检测奠定基础.方法:利用PCR技术,从质粒pUC18(G10)、pUC18(CTL)中扩增G126和CTL基因,通过DNA重组技术构建含DsbA-G126-Linker-CTL(DsbA-GLC)融合基因的表达载体pET(GLC).转化宿主菌…查看全部>>
卡介菌纯蛋白衍生物和结核菌素纯蛋白衍生物在结核病筛查中差异对比的Meta分析CSTPCD
作者：丁小娟王丹张耀之贺建清
发表期刊：中国防痨杂志 2022年10期
关键词：结核重组蛋白质类结核菌素Meta分析
摘要：为探讨卡介菌纯蛋白衍生物(BCG-PPD)和结核菌素纯蛋白衍生物(TB-PPD)在结核病筛查中的差异.笔者检索PubMed、Embase、Medline、Cochrane Library、中国知网和万方数据库从建库至2022年2月期间发表的相关文献,对符合纳入条件的文献采用Open Meta Analyst软件进行Meta分析,采用Rev Man 5.3软件Cochrane偏倚风险评估工具对文献进行质量评价.最终纳入7篇文献,共361…查看全部>>
小牛血清和胎牛血清对Sf9细胞生长和重组蛋白表达影响的比较北大核心CSCDCSTPCD
作者：金小红孟哲峰陈存国
发表期刊：中国病理生理杂志 2006年2期
关键词：幼牛血清胎牛血清Sf9细胞重组蛋白质类
摘要：目的:比较小牛血清和胎牛血清对Sf9细胞生长的影响以及两种血清条件下重组蛋白表达的差异,探讨小牛血清用于Sf9细胞培养和重组蛋白工艺化生产的可行性.方法:①在细胞培养板中,分别以含10%小牛血清和10%胎牛血清的Grace培养液培养Sf9细胞,每天进行细胞计数和XTT比色分析,并绘制生长曲线.②重组杆状病毒感染两种血清培养下的Sf9细胞,培养72 h后收集细胞,ELISA检测细胞内重组蛋白的表达量.结果:胎牛血清培养液中Sf9细胞生长…查看全部>>
重组人EGF包涵体与37×103菌体蛋白的稳定性北大核心CSCDCSTPCD
作者：智庆文徐莉齐秀丽刘敏
发表期刊：军事医学科学院院刊 2009年1期
关键词：rhEGF包涵体大肠杆菌重组蛋白质类
摘要：大肠杆菌BL21（DE3）是最常用的工程菌株之一，许多外源蛋白得已成功表达[1-6]。以其作为宿主菌进行外源蛋白表达时，往往形成包涵体[3-5]，包涵体结构复杂，一般含有50％以上的目的重组蛋白，其余为核糖体元件、RNA聚合酶、大肠杆菌的外膜蛋白、质粒DNA以及脂体、脂多糖等。包涵体为大小0．5—1 μm的颗粒状，难溶于水，只溶于变性剂如尿素、盐酸胍等[7]。包涵体的形成可抵抗菌体内蛋白酶的降解，得到较高的表达量，给后续的纯化工作带来方便[8]。
铁饱和重组人乳铁蛋白对大鼠缺铁性贫血的恢复作用北大核心CSCDCSTPCD
作者：房玥晖冯鑫徐昊吴峥昊许雅君
发表期刊：北京大学学报（医学版） 2013年3期
关键词：贫血,缺铁性乳铁蛋白重组蛋白质类硫酸亚铁
摘要：目的:研究铁饱和重组人乳铁蛋白(iron saturated recombinant human lactoferrin,Fe-rhLf)对缺铁性贫血的恢复作用.方法:实验用4周龄雄性SD大鼠喂饲低铁饲料(铁含量8.9 mg/kg)和去离子水.实验第4周选取血红蛋白小于100 g/L的大鼠,按体重和血红蛋白水平分为贫血模型对照组、硫酸亚铁阳性对照组和3个Fe-rhLf干预组进行贫血恢复试验.硫酸亚铁对照组以5.43 mg/(kg ·d…查看全部>>
尿酸氧化酶的表达纯化及活性形式鉴定北大核心CSCD
作者：吴伟立李彦英苗林徐金森方宏清陈惠鹏
发表期刊：军事医学科学院院刊 2005年2期
关键词：尿酸氧化酶重组蛋白质类大肠杆菌共价交联聚合酶链反应
摘要：目的:在大肠杆菌内表达具有活性的黄曲霉尿酸氧化酶.方法:用重叠PCR从黄曲霉(Aspergillus flavus)3.1398中钓取了尿酸氧化酶(urate oxidase,UO,EC 1.7.3.3)基因,克隆到原核表达载体pET22b中,转化大肠杆菌 BL21(DE3),筛选到高表达的重组转化子菌株.经乳糖诱导目的蛋白表达,阴离子交换柱纯化,获得纯品.SDS-PAGE分析样品纯度.用尿酸缓冲液测定酶活性,用戊二醛交联结合质谱法测…查看全部>>
严重烫伤后高迁移率族蛋白-1基因表达的改变及意义
作者：方文慧姚咏明施志国于燕吴叶陆连荣盛志勇
发表期刊：感染、炎症、修复 2000年1期
关键词：烧伤高迁移率族蛋白-1基因表达内毒素类重组蛋白质类
摘要：目的:观察烫伤后肝、肺组织高迁移率族蛋白-1(HMG-1)mRNA表达的变化规律及其与器官功能损害的关系.方法:采用大鼠35%Ⅲ°烫伤模型,动物随机分为正常对照组(n=7)、烫伤组(n=24)和重组杀菌/通透性增加蛋白(rBPI21)治疗组(n=12),留取组织和血标本分别检测组织内毒素含量、HMG-1 mRNA表达及器官功能指标.结果:严重烫伤后早期肝、肺组织HMG-1基因表达改变不明显,伤后24小时则明显增多(P＜0.05-0.0…查看全部>>
重组人肝细胞生长因子β链工程菌的高密度发酵CSTPCD
作者：韩兵社张俊芳解军常冰梅程牛亮牛勃
发表期刊：山西医科大学学报 2004年3期
关键词：肝细胞生长因子重组蛋白质类大肠杆菌发酵分批补料培养
摘要：目的实现重组人肝细胞生长因子β链(rhHGFβ)工程菌的高密度高表达发酵.方法首先在摇瓶中进行了培养条件的摸索,确定了该工程菌的培养条件、诱导起始时间和诱导时间,然后用15 L自控发酵罐进行分批补料培养,发酵中分阶段限制性流加氮、碳源,保持溶氧在30%以上.结果菌体发酵密度达到39 g/L(湿菌重),达到并超过了重组蛋白在摇瓶中的表达水平,重组蛋白的表达占菌体总蛋白的30%左右.结论本研究为rhHGFβ进一步下游纯化及功能研究奠定了基础.
结核分枝杆菌glcB基因原核表达质粒的构建、表达和纯化CSTPCD
作者：陈曦张宗德贾红彦古淑香李自慧刘忠泉郑晓静邢爱英杜博平张继增
发表期刊：中国防痨杂志 2009年9期
关键词：分枝杆菌结核重组蛋白质类
摘要：目的构建结核分枝杆菌glcB基因原核表达工程株,并进行表达、纯化.方法用PCR扩增结核分枝杆菌glcB基因,并克隆入pTA2质粒.测序正确后,再亚克隆入pET30a(+)质粒,构建pET30a(+):glcB重组体,转化宿主菌大肠埃希菌BL21(DE3).结果结核分枝杆菌glcB基因工程株经0.4 mM异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后,表达出相对分子质量为92 kD重组蛋白.SDS-PAGE分析显示,IPTG诱导4…查看全部>>
5种结核分枝杆菌特异蛋白质的抗原性分析CSTPCD
作者：杨柳苏明权岳乔红张建芳马越云刘家云郝晓柯
发表期刊：中国防痨杂志 2009年7期
关键词：分枝杆菌,结核重组蛋白质类抗原,细菌细菌蛋白质类
摘要：目的评价14、16、38 kD、mtb81和ESAT-6等5种结核分枝杆菌特异蛋白质的抗原性.方法利用14、16、38 kD、mtb81和ESAT-6等5种重组蛋白建立ELISA方法,检测120份结核病人、30份非结核呼吸道感染病人和30份健康人血清中相应抗体.结果 ELISA显示5种结核杆菌特异性蛋白质的特异性均高于95%;敏感性和准确性则不尽相同,其中38 kD的检测敏感性最高,为80.8%;14、16 kD、mtb81和ES…查看全部>>

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