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油茶AFLP反应体系建立及其在遗传多样性研究上的应用北大核心CSCDCSTPCD
作者：金龙刘冰周明善吴山忠王勤束庆龙张良富曹翠萍
发表期刊：安徽农业大学学报 2012年4期
关键词：AFLPs油茶遗传多样性PCR反应体系分子标记
摘要：通过试验分析建立了适合油茶且简便易行的AFLP反应体系,筛选出了4对能够反映多态性的有效引物,并对油荼的遗传多样性进行了初步分析.平均每对引物扩增出23个具有清晰条带的位点,其中多态性位点数N为18,多态性位点百分率PPL为79.13％,有效等位基因数ne为1.320,Nei's期望杂合度He为0.184,Shannon多态性信息指数I为0.267.研究结果表明了AFLP标记技术在油茶遗传多样性研究上的适用性,同时也显示了油茶具有较高…查看全部>>
濒危植物长叶榧ISSR-PCR反应体系的建立北大核心CSCDCSTPCD
作者：金则新李钧敏
发表期刊：西北林学院学报 2006年5期
关键词：长叶榧ISSRPCR反应体系
摘要：以国家2级保护植物长叶榧为材料,对ISSR反应体系中的各个主要影响因子进行了优化筛选,建立了长叶榧ISSR-PCR的反应体系,其较适宜的扩增条件为:10μL PCR反应体积,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol/L Tris·HCl pH9.0,50 mmol/L KCl,0.1%Triton X-100),1.5mmol/L MgCl2,1U Taq酶(上海华美公司),10 ng模板DNA,6 pmol引物(上海Sangon…查看全部>>
荧光定量PCR技术及其在动物检疫中的应用北大核心
作者：孙晓智石鑫吴绍强
发表期刊：中国动物检疫 2006年12期
关键词：PCR技术荧光定量动物检疫应用PCR反应体系交叉污染chainPCR方法
摘要：作为体外基因的快速扩增技术，PCR的应用存在很多局限性，如伴随高敏感性而引起的假阳性、EB染色对操作者的危害及环境的污染。为了克服这些缺陷，荧光定量PCR（fluorescence quantitative polymerase chain reaction，FQ-PCR）应运而生，FQ—PCR解决了传统PCR方法不能准确定量、易交叉污染等实际问题，反应过程中通过实时监测PCR反应体系中的荧光信号便可得知靶序列…查看全部>>
珍稀濒危植物银缕梅ISSR-PCR反应体系建立及优化
作者：陈云霞路志远肖卓恒
发表期刊：安徽农业科学 2018年11期
关键词：银缕梅ISSRPCR反应体系资源保护
摘要：[目的]建立和优化银缕梅ISSR-PCR反应体系.[方法]采用正交试验和单因子试验对影响PCR扩增体系中的Mg2 +浓度、dNTPs、模板DNA及引物浓度、Taq酶用量5个因子进行分析研究.[结果]银缕梅ISSR-PCR 25 μL反应体系中5个因子最优水平:DNA模板(20 ng/μL)2.50 μL,引物(10 μmol /L)1.00 μL,Taq酶(5 U/μL)0.10 μL,Mg2 +(25 mmol/L)3.00 μL,…查看全部>>
黑麦特异性PCR反应体系的建立
作者：任如意
发表期刊：安徽农业科学 2011年13期
关键词：黑麦PCR反应体系优化
摘要：[目的]建立黑麦特异性PCR反应优化体系.[方法]以普通小麦"中国春"、S165、黑麦、八倍体小黑麦、六倍体小黑麦为试验材料,研究了模板DNA、引物、dNTPs、Mg<'2+>"浓度、TaqDNA聚合酶用量及退火温度对黑麦特异性PCR反应体系的影响.[结果]采用改良的CTAB DNA微量提取法可以得到高质量的基因组DNA,满足PCR反应模板的要求,黑麦特异PCR扩增反应体系为:在25μl反应体系中,10×缓冲液,1.5 m…查看全部>>
菰SRAP-PCR反应体系的优化与建立北大核心CSCDCSTPCD
作者：任绪瑞刘艳玲杨美陈媛媛王冬良陈友根
发表期刊：热带作物学报 2014年2期
关键词：菰SRAPPCR反应体系优化
摘要：利用单因素分析法对影响菰SRAP-PCR扩增效果的Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶、DNA模板和引物浓度5种因素进行了优化.结果表明:建立了适合菰基因组的SRAP-PCR的体系:1μL 10×Buffer、0.5U TaqDNA聚合酶、2mmol/L MgC12、50 ng模板DNA、0.20 mmol/L dNTPs、正反向引物的浓度各为0.7 μmol/L,共10μL.选取5对引物,利用该体系对72份菰样本进行PC…查看全部>>
油茶SSR-PCR反应体系建立与优化北大核心CSCDCSTPCD
作者：刘冰金龙曹翠萍王勤周明善吴山忠束庆龙张良富
发表期刊：安徽农业大学学报 2011年6期
关键词：油茶微卫星标记PCR反应体系优化
摘要：油茶是我国特有的木本食用油料树种,本研究采用正交试验和单因素试验,建立并优化了油荼SSR-PCR反应体系.结果表明,油茶最适SSR-PCR反应体系为模板DNA(5～10 ng·L-1)1.0 L,Mg2+(25 mmol·L-1)0.7 L,dNTP(10 mmol·L-1)0.15 L,正反向引物均为(10 mol·L-1)0.2 L,TaqDNA聚合酶(5 U·L-1)0.1 L,10 PCR缓冲液1.0 L,HPLC水6.65 …查看全部>>
油茶SRAP-PCR反应体系的建立与引物筛选北大核心
作者：张婷吕明治董妍玲范睿
发表期刊：安徽农业科学 2010年17期
关键词：油茶SRAPPCR反应体系引物筛选
摘要：[目的]建立油茶SRAP-PCR的反应体系,并筛选合适的引物.[方法]采用CTAB法提取油茶基因组DNA,DNA扩增时采用PCR技术,扩增结果采用电泳法和成像系统进行分离和记录. [结果]在30 μl反应体系中,适宜浓度分别是Mg2+1.5 mmol/L 、模板DNA 90 ng、引物 0.21 μmol/L、dNTPs 110 μmol/L、Taq DNA聚合酶 1.5 U;反应程序中第2次最适退火温度为49 ℃.…查看全部>>
光皮桦EST-SSR PCR反应体系的优化北大核心CSCDCSTPCD
作者：陈争姜小凤童再康
发表期刊：浙江农林大学学报 2012年6期
关键词：林木育种学光皮桦EST-SSRPCR反应体系正交设计
摘要：为获得稳定的聚合酶链式反应(PCR)产物,采用正交设计L25(56)对光皮桦Betula luminifera表达序列标签-简单重复序列聚合酶链式反应(EST-SSR PCR)反应体系中的5个因素:DNA模板浓度,引物浓度,镁离子(Mg2+)浓度,三磷酸碱基脱氧核苷酸(dNTPs)浓度和DNA聚合酶量进行优化,每个因素设计5个水平.优化试验结果表明:光皮桦EST-SSR最佳PCR反应体系:4.0 mg·L-1DNA模板,0.500 μ…查看全部>>
甜柿SSR扩增反应体系的建立CSTPCD
作者：段国锋李丽娟王争争刘群龙
发表期刊：山西农业大学学报（自然科学版） 2015年3期
关键词：甜柿SSRPCR反应体系
摘要：本试验采用正交试验设计法,对“阳丰”甜柿SSR-PCR体系中DNA模板浓度、MgCl2浓度、dNTPs浓度、引物、Taq酶用量等进行了优化,通过琼脂糖凝胶电泳对谱带进行分析,结果表明体系10为最佳体系:20 μL扩增反应体系中,25 mmol·L-1 MgCl2溶液1.4 μL,10 mmol·L-1 dNTPs混合液0.4μL,10 mmol·L-1引物1.1μL,5U·μL-1 Taq酶液0.4μL,10 ng·μL-1 DNA溶…查看全部>>

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