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阴离子交换固相萃取GC-MS/MS方法检测鱼肉制品中的河豚毒素北大核心CSCDCSTPCD
作者：林缨陈佳刘勤吴弼东谢剑炜
发表期刊：军事医学 2012年6期
关键词：河豚毒素固相萃取气相色谱-串联质谱C9碱
摘要：目的建立高灵敏度的检测鱼肉制品中河豚毒素的阴离子交换固相萃取(SPE)气相色谱-串联质谱法.方法采用直接碱解的样品处理方法,将鱼肉制品中的河豚毒素转化为C9碱,经阴离子交换(SAX)固相萃取柱净化、双三甲基硅基三氟乙酰胺(BSTFA)硅烷化衍生后,在气相色谱-串联质谱仪上以选择反应监测(SRM)模式进行检测.结果与结论在最优分析条件下,染毒的鱼肉样品中河豚毒素的线性范围为10～1000 μg/kg,检测限为8 μg/kg.该方法…查看全部>>
基于CHO细胞定点整合技术的新型抗体呈现系统的构建北大核心CSCDCSTPCD
作者：何阳阳刘敏李春张畅孙志伟刘志刚王双庞晓斌
发表期刊：军事医学 2012年8期
关键词：抗体库CHO细胞展示系统高通量筛选抗VEGF特异性抗体
摘要：目的建立一个以CHO定点整合系统为基础的高通量抗体筛选平台,筛选获得抗VEGF高亲和力突变体抗体.方法设计并构建了基于CHO细胞定点整合系统的通用minibody展示载体,将3株亲和力已知的抗VEGF抗体(A6,A63,A657)和1个抗VEGF轻链抗体库分别呈现在CHO细胞的表面,通过Western印迹、Bia-core3000、流式细胞分析等对该展示系统进行验证和评价,并通过流式细胞分选技术对抗体库进行了细胞筛选.结果成功实…查看全部>>
CUL4A-DDB1细胞稳定株筛选及DNA双链断裂模型构建北大核心CSCDCSTPCD
作者：黄思斯焦杨谢萍王青张令强
发表期刊：军事医学 2012年7期
关键词：DNA损伤CUL4A-DDB1串联亲和纯化
摘要：目的为了鉴定并验证CUL4A-DDB1泛素连接酶复合体中参与DNA损伤修复反应过程的1~2种关键成分在损伤识别、早期及晚期修复中的动态变化,拟构建含有串联亲和纯化(TAP)标签载体并筛选高表达CUL4A/ DDB1的细胞株,建立DNA双链断裂模型.方法利用PCR获得CUL4A/DDB1基因,构建重组表达载体pNTAP-A-CUL4A/ DDB1;使用顺铂和电离辐射刺激等外界刺激建立合适的DNA双链断裂细胞模型,使用G418筛选稳定…查看全部>>
RBBP6敲除小鼠胚胎致死原因的探讨北大核心CSCDCSTPCD
作者：徐亮李大虎谢萍王少霞李杨彭瑞云张令强汪思应
发表期刊：军事医学 2012年7期
关键词：RBBP6DNA损伤γH2AX免疫组化小鼠基因敲除
摘要：目的探索成视网膜细胞瘤基因结合蛋白6(Rb binding protein 6,RBBP6) 基因敲除小鼠胚胎致死的原因.方法敲低细胞内源性RBBP6后检测磷酸化组蛋白H2AX(phosphorylated histone H2AX,γH2AX)的蛋白水平,利用免疫组化检测RBBP6-/-小鼠胚胎中γH2AX的蛋白水平,由此分析两者的相关性.结果 RBBP6敲低的细胞中γH2AX蛋白水平显著上调,RBBP6-/-小鼠胚胎中γH2…查看全部>>
有机磷化合物体外全血胆碱酯酶检测方法学研究北大核心CSCDCSTPCD
作者：张瑞华李丽琴石童王陈徐建富
发表期刊：军事医学 2012年6期
关键词：有机磷化合物乙酰胆碱酯酶DTNB
摘要：目的建立一种在体外快速测定乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的方法,为有机磷毒剂中毒的诊断及救治提供依据.方法用改良的5,5-连硫代-双-2-硝基苯甲酸(DTNB)法测定AChE活性,以兔全血作为酶源进行方法学研究,并用不同种属动物全血进行了适用性考察,用SPECTRA MAX 190读板机测定412 nm处光密度的变化即可测定AChE活性.结果不同动物全血40倍稀释后作为酶源较为合适,批内差异为0.44%～0.67%,批间差异…查看全部>>
新型雌激素受体β信号通路调节因子的分离及鉴定北大核心CSCDCSTPCD
作者：韩聚强焦园园丁丽华袁斌王晓辉张浩李杰之吕秋军叶棋浓
发表期刊：军事医学 2006年6期
关键词：结缔组织生长因子(CTGF)受体,雌激素相互作用GST沉降试验
摘要：目的:利用酵母双杂交技术筛选与ERβ相互作用的蛋白,为进一步研究ERβ的功能奠定基础.方法:从乳腺cDNA文库中钓取ERβ-AF1 cDNA,构建诱饵蛋白载体pAS2-1-ERβ-AF1,利用酵母双杂交筛选技术,在乳腺cDNA文库中筛选与ERβ-AF1相互作用的蛋白.将含有pACT2-候选基因的酵母菌与含有pAS2-1-ERβ-AF1的酵母菌进行交配实验,利用LacZ报告基因检测ERβ-AF1与候选蛋白之间是否存在相互作用.然后将ER…查看全部>>
真核表达东方马脑炎病毒衣壳蛋白Capsid抑制IFNγ应答基因转录北大核心CSCDCSTPCD
作者：崔艳刘海楠李伟李平曹诚
发表期刊：军事医学 2012年7期
关键词：马脑炎病毒,东方衣壳蛋白质类真核表达IFN应答基因
摘要：目的克隆东方马脑炎病毒(EEEV)衣壳蛋白(Capsid)基因,构建其真核表达载体,检测该基因在293细胞中的表达,并初步研究其对干扰素(IFN)应答基因表达的影响.方法构建包含EEEV capsid基因的真核表达载体pcDNA3-Flag-capsid,以威格拉斯脂质体转染293细胞进行瞬时表达,Western印迹检测其表达情况;应用定量PCR比较IFN效应基因Gbp1,Gbp2和Isg15在pcDNA3-Flag-capsid…查看全部>>
胸腺五肽微乳的处方筛选及质量评价北大核心CSCDCSTPCD
作者：贾煜娇徐风华
发表期刊：军事医学 2012年7期
关键词：胸腺五肽反相微乳Km值滴定法伪三元相图
摘要：目的对胸腺五肽反相微乳处方进行筛选并予以评价.方法采用Km值滴定法(Km=m乳化剂∶m助乳化剂)绘制反相微乳各体系的伪三元相图,考察亲水疏水平衡值(hydrophile-lipophile balance number,HLB)、Km值、表面活性剂、助表面活性剂、油相等对反相微乳形成区域及最大载水量的影响,最终确定处方.结果通过绘制伪三元相图,确定微乳的最终处方为油相∶大豆磷脂∶助表面活性剂∶水相=4∶1.67∶3.33∶…查看全部>>
机动医院信息系统的设计北大核心CSCDCSTPCD
作者：张文昌刘志国谭树林王先文
发表期刊：军事医学 2012年7期
关键词：机动医院信息系统电子伤票LISPACS远程会诊
摘要：目的对机动医院信息系统进行组网设计和优化.方法通过对医院信息系统组网分析,结合机动医院特点,组建适合快速展开、安全的通信网络.结果组建机动医院信息网络,应用于战时机动医院信息系统,完成电子伤票、实验室信息系统(LIS)、图像存档与通讯系统(PACS)、放射学信息系统(RIS)、远程会诊等功能.结论设计一套适合机动医院信息系统组网方案,将提高我军机动医院信息化水平.
LRP16通过增强ERα介导的转录激活活性促进乳腺癌MCF-7细胞增殖北大核心CSCDCSTPCD
作者：臧丽韩为东母义明伍志强李琦赵亚力陆菊明潘长玉
发表期刊：军事医学 2006年6期
关键词：LRP16基因雌激素受体αMCF-7细胞周期蛋白D1
摘要：目的:探讨LRP16基因促进MCF-7细胞增殖的分子生物学机制.方法:(1)将ERα模式启动子调控的荧光素酶报告子(3×ERE-Luc)与ERα,LRP16真核表达载体共转染MCF-7细胞,测定3×ERE-Luc的相对荧光素酶活性;(2)将3×ERE-Luc,ERα真核表达载体、针对LRP16的小干扰RNA(LRP16-siRNA374,LRP16-siRNA668)或对照小干扰RNA(control-siRNA)共转染MCF-7细胞…查看全部>>

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