高分辨熔解曲线技术结合荧光实时PCR法同时检测鸡肉中4种食源性致病菌OA北大核心
High-resolution Melting Curve Analysis Coupled with Fluorescence Real-time PCR for Simultaneous Detection of Four Food-borne Pathogenic Bacteria in Chicken
建立高分辨熔解曲线技术同时快速检测鸡肉中沙门氏菌、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌和空肠弯曲菌.本研究分别以上述4种菌的fimY、hly、nuc和orfC特异性基因为靶基因,建立能同时检测多种食源性致病菌的多重HRM-real time PCR检测体系,并对反应的特异性、灵敏度、重复性以及在人工染菌样品进行了评价.所建立的HRM-real time PCR检测体系对沙门氏菌、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌和空肠弯曲菌均产生特异性熔解曲线,Tm值分别为82.2℃、78.2℃、75.5℃和73.5℃;多重HRM-real time PCR反应体系检测单一致病菌菌液的灵敏度均为102拷贝数/mL,检测多种致病菌菌液的灵敏度为102拷贝数/mL;该反应体系重复性的试验内CV值在0.03％～0.32％之间,试验间CV值在0.45％～2.12％;人工染菌样本对4种菌的检测限均能达到5 CFU/25 g.结果表明该多重HRM-real time PCR检测体系可对上述4种禽肉中常见致病菌进行有效的检测与区分,特异性强,灵敏度高,反应重复性好,有望在食源性致病菌检测分析中发挥作用.
张静;周倩;唐梦君;张小燕;唐修君;陆俊贤;高玉时;顾荣
江苏省家禽科学研究所,江苏扬州 225125江苏省家禽科学研究所,江苏扬州 225125江苏省家禽科学研究所,江苏扬州 225125江苏省家禽科学研究所,江苏扬州 225125江苏省家禽科学研究所,江苏扬州 225125江苏省家禽科学研究所,江苏扬州 225125江苏省家禽科学研究所,江苏扬州 225125江苏省家禽科学研究所,江苏扬州 225125
高分辨熔解曲线食源性致病菌荧光PCR鸡肉
《现代食品科技》 2021 (6)
296-303,8
国家自然科学青年基金项目(31700005)扬州市社会发展项目(YZ2020060)江苏省属公益类科研院所自主科研经费(BM2018026)江苏省现代农业产业技术体系建设专项资金资助(JATS[2020]359)
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