大肠杆菌O157∶H7实时荧光定量PCR快速检测试剂盒的组建及活菌检测OA北大核心CSTPCD
Assembly of A Fluorescence-based Quantitative Real-time PCR Rapid Detection Kit for Viable Escherichia coli O157∶H7
该研究组建了基于高分辨熔解曲线分析的大肠杆菌O157∶H7实时荧光定量PCR快速检测试剂盒,对试剂盒的灵敏度、特异性、抗干扰能力和检测人工污染样品的情况进行了评估,并在组建试剂盒的基础上,利用叠氮溴化丙锭(PMAxx)对活/死细胞的选择性,构建了大肠杆菌O157∶H7活菌定量检测技术.结果 显示,试剂盒特异性强,仅大肠杆菌O157∶H7血清型有阳性扩增;最低检测限为84 CFU/mL;在四种常见食源性致病菌干扰下能准确检测出大肠杆菌O157∶H7;在人工污染食品样品的实际检测中,可检测到初始污染量为7.97×100 CFU/mL的样品;通过单因素变化试验对PMAxx处理的各项参数进行优化,确立了曝光时间11min、暗孵育时间20 min、PMAxx浓度30 μmol/L的最优反应体系,并与本研究组建的实时荧光定量PCR试剂盒相结合,建立了在3.4× 107～3.4× 102 CFU/mL浓度范围内Ct值与菌液浓度线性关系良好的大肠杆菌O157∶H7活菌定量检测方法,为食源性致病菌快速定量检测提供技术支持.
魏婉晴;孔梁宇;胡瑞瑞;陆兆新;周立邦;孟凡强;别小妹
南京农业大学食品科技学院,江苏南京210095南京农业大学食品科技学院,江苏南京210095南京农业大学食品科技学院,江苏南京210095南京农业大学食品科技学院,江苏南京210095南京农业大学食品科技学院,江苏南京210095南京农业大学食品科技学院,江苏南京210095南京农业大学食品科技学院,江苏南京210095
大肠杆菌O157∶H7买时荧光定量PCR高分辨熔解曲线快速检测试剂盒叠氮溴化丙锭活菌检测
《现代食品科技》 2022 (1)
94-103,10
国家重点研发计划重点专项(2018YFC1602500)江苏省农业科技自主创新项目(CX(18)3053)
评论