大肠杆菌必需基因的CRISPR-Cas9敲除策略及高效质粒置换方法OACSTPCD
CRISPR/Cas9 knockout strategy for essential genes in Escherichia coli and efficient plasmid replacement methods
由于必需基因的功能必须性使其难以从基因组上被删除,而此前报道的方法存在效率低、非无痕敲除等缺点.基于此,该文建立了一种基于 CRISPR/Cas9 的基因组必需基因高效无痕敲除方法.以大肠杆菌 metK基因(编码 S-腺苷甲硫氨酸合酶)为例,首先将 metK基因克隆至质粒 pTarget-metK,并采用定点突变方式将 metK基因进行同义突变移除对应的 PAM 序列,构建获得质粒 pHL3.进一步构建含有与 pHL3 相同 metK 的回补质粒…查看全部>>
刘锦辉;黄建峰;尤晓颜;张燕飞
河南科技大学 食品与生物工程学院,河南 洛阳,471023中国科学院天津工业生物技术研究所,国家合成生物学技术创新中心,天津,300308河南科技大学 食品与生物工程学院,河南 洛阳,471023中国科学院天津工业生物技术研究所,国家合成生物学技术创新中心,天津,300308
必需基因CRISPR/Cas9基因编辑质粒置换无痕敲除
essential genesCRISPR/Cas9gene editplasmid replacementnon-makerless knockout
《食品与发酵工业》 2023 (18)
应用系统生物学手段揭示布氏嗜酸两面菌钼抗性分子机制
17-23,7
国家自然科学基金(2220836631200035)
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