柴胡皂苷D对紫杉醇耐药乳腺癌细胞耐药性的逆转作用研究OA

目的:研究柴胡皂苷 D对紫杉醇(paclitaxel,PTX)耐药的乳腺癌细胞(MCF-7/PTX)耐药性的逆转作用及其机制.方法:采用噻唑蓝溴化四唑法(MTT法)测定不同质量分数(0、12.5、25、50、100、200 mg/L)PTX处理 MCF-7/PTX细胞和 MCF-7 细胞 48 h的细胞存活率,确定 MCF-7/PTX 细胞对 PTX 的耐药程度.采用 MTT 法测定不同质量分数(0.125、0.25、0.50、1.00 mg/L)柴胡皂苷 D处理MCF-7/PTX细胞 48 h的细胞增殖抑制率,确定柴胡皂苷D对 MCF-7/PTX细胞的安全性.采用 MTT法测定确定 0.125、0.25 和 0.5 mg/L 柴胡皂苷 D 能否调节 MCF-7/PTX细胞对 PTX的敏感性.采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)和流式细胞术分别检测不同质量分数的柴胡皂苷 D 对Yes相关蛋白(YAP)和 P 糖蛋白(P-gp)表达的影响.进行罗丹明 123(Rh123)积累和外流测定.结果:与 0 mg/L PTX对比,MCF-7 和MCF-7/PTX细胞存活率随PTX质量分数增加而降低,且呈现依赖性(P<0.05);确立 100 mg/L PTX作为 MCF-7/PTX细胞的给药质量分数.0.125、0.25 和 0.50 mg/L 柴胡皂苷 D 对 MCF-7/PTX 细胞无明显毒性,MCF-7/PTX细胞增殖抑制率随柴胡皂苷 D质量分数增加而升高.与 PTX组对比,0.125、0.25 和 0.50 mg/L柴胡皂苷 D组 MCF-7/PTX细胞 IC50、YAP 和 p-YAP 蛋白、P-pg mRNA 表达水平降低(P<0.05 或 P<0.01).与 PTX组对比,柴胡皂苷 D处理的 MCF-7/PTX细胞积累更多 Rh123,降低 Rh123 外排速度(P<0.01).结论:柴胡皂苷 D可能通过下调 Hippo/YAP 通路逆转 P-gp介导的乳腺癌耐药.