噬菌体TM4中LysinB蛋白的特征及抗菌特性研究OA

目的对分枝杆菌噬菌体TM4LysinB蛋白序列进行生物学分析,原核表达LysinB蛋白并评估其体外杀菌特性。方法合成噬菌体TM4 LysinB基因,构建原核表达重组质粒,诱导蛋白可溶表达、纯化,通过在线软件程序分析噬菌体TM4 LysinB蛋白的生物学特征;在7H9培养基中培养耻垢分枝杆菌,检测其杀菌效果及稳定性。结果LysinB蛋白理论等电点为6.66,不稳定指数为28.71,为稳定蛋白质,且为两亲性蛋白。二级结构中,无规则卷曲、α-螺旋、β-折叠和转角分别占42.00%、40.25%、12.00%和5.75%;三级结构中,无规则卷曲含量高,由11~73位AA组成的肽段构成肽聚糖结合结构域。预测出B细胞抗原表位区段和T细胞抗原表位的强结合肽段。LysinB蛋白具有显著的体外杀耻垢分枝杆菌的能力,pH8.0的PBST蛋白缓冲液有利于在实验周期内维持LysinB蛋白的杀菌效果。结论进一步了解分枝杆菌噬菌体TM4裂解酶LysinB蛋白,为研制可稳定贮存的噬菌体酶制剂及其临床应用提供参考。