籽鹅肠道中非解乳糖链球菌的分离鉴定及益生特性研究OA北大核心CSTPCD

【目的】从籽鹅肠道中分离筛选用于改善籽鹅健康状况的潜在益生菌株,并研究其益生特性。【方法】采集健康籽鹅不同肠段内容物,梯度稀释后涂布于含碳酸钙的MRS(CaCO_(3)-MRS)固体培养基上,经厌氧培养后,通过形态学、生化试验、16S rRNA基因PCR扩增对分离菌株进行鉴定,采用耐酸试验和抑菌试验对菌株益生特性进行筛选,评价其抑菌能力、抗生素敏感性、耐酸和耐胆盐能力、胃肠液耐受能力,并测定其生长曲线和产酸曲线。【结果】从健康籽鹅肠道中分离得到4株疑似乳酸菌,命名为RS-1、RS-2、RS-3和RS-4,其中RS-3菌株具有良好的益生特性。RS-3菌株在CaCO_(3)-MRS培养基上的菌落形态为表面光滑、淡黄色、产生明显溶钙圈的圆形菌落,为革兰阳性杆菌。生化试验结果显示,分离菌株均可发酵麦芽糖、纤维二糖、蔗糖、棉子糖、菊糖和乳糖,也可发酵甘露醇、山梨醇和水杨苷,且七叶苷试验和1%马尿酸钠试验均为阳性,初步判定分离菌株均为乳酸菌。经16S rRNA基因序列分析鉴定,4株分离菌均为非解乳糖链球菌(Streptococcus alactolyticus),其中RS-3菌株耐受性优于其他3株分离菌。RS-3菌株发酵液对金黄色葡萄球菌有较好的抑制效果,抑菌圈直径达10 mm以上,对卡那霉素、阿米卡星、罗红霉素、磺胺嘧啶、林可霉素、多黏菌素B和诺氟沙星耐药。RS-3菌株具有酸、胆盐及人工胃液和肠液的耐受性,灌胃小鼠后其生长状况良好。【结论】试验分离得到4株籽鹅肠源型非解乳糖链球菌,其中RS-3菌株具有较好的抑菌、耐酸、耐胆盐益生特性,可作为后续开发鹅用益生菌制剂的一种可靠的菌株来源。