电针通过SIRT1/ATG7调控肝脏脂肪代谢改善胰岛素抵抗的机制研究OACSTPCD

目的:探讨电针激活沉默信息调节因子1(SIRT1)/自噬相关蛋白7(ATG7)通路调控肝脏脂肪代谢改善胰岛素抵抗(IR)的机制。方法:50只Wistar雄性大鼠,随机挑选8只喂养标准饲料,为空白对照组;其余大鼠喂养高脂饲料8周,构建胰岛素抵抗大鼠模型。从造模成功的大鼠中挑选32只随机分为模型组、电针组、激动剂组和电针联合抑制剂组,每组8只。电针组给予“关元”“中脘”“足三里”“丰隆”电针干预,留针10 min;电针联合抑制剂组腹腔注射EX-527溶液,同步电针干预;激活剂组白藜芦醇溶液灌胃;均1次/2 d,3次/周,连续8周。记录各组大鼠干预前后体质量,全身胰岛素敏感性(GIR)。干预后,检测血清胰岛素(INS)、腹腔胰岛素耐量(IPITT)、血清高密度脂蛋白(HDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)、肝脏总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量;采用Western blot法,检测并观察肝脏组织中固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3β)蛋白表达,RT-PCR及免疫荧光法检测SIRT1、ATG7基因及荧光表达。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠GIR降低,差异具有统计学意义(P<0.01),血清INS含量、90 min与120 min IPITT、VLDL、肝脏TC及TG升高,差异具有统计学意义(P<0.01),血清HDL降低,差异具有统计学意义(P<0.01),SREBP、p-GSK3β蛋白表达增多,差异具有统计学意义(P<0.01),SIRT1、ATG7 mRNA、荧光密度降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,电针组大鼠GIR升高,差异具有统计学意义(P<0.01),血清INS含量、90 min IPITT降低,差异具有统计学意义(P<0.01),120 min IPITT,VLDL降低,差异具有统计学意义(P<0.05),HDL升高,差异具有统计学意义(P<0.05),肝脏TC、TG降低,差异具有统计学意义(P<0.01),SREBP蛋白表达减少,差异具有统计学意义(P<0.01),p-GSK3β蛋白表达减少,差异具有统计学意义(P<0.05),SIRT1mRNA表达增多,差异具有统计学意义,SIRT1荧光密度升高,差异具有统计学意义(P<0.05),ATG7 mRNA表达增多,差异具有统计学意义(P<0.05),ATG7荧光密度升高,差异具有统计学意义(P<0.01);激动剂组大鼠GIR升高,血清INS含量、90 min与120 min IPITT降低,差异具有统计学意义(P<0.01),HDL升高,差异具有统计学意义(P<0.05),VLDL降低,肝脏TC、TG降低,差异具有统计学意义(P<0.01),SREBP、p-GSK3β蛋白表达减少,差异具有统计学意义(P<0.05),SIRT1 mRNA、荧光密度升高,差异具有统计学意义(P<0.01),ATG7 mRNA、荧光密度升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与电针组比较,电针联合抑制剂组大鼠GIR降低,差异具有统计学意义(P<0.05),血清INS含量升高,差异具有统计学意义(P<0.05),90 min与120 min IPITT、VLDL升高,HDL降低,肝脏TC、TG升高,差异具有统计学意义(P<0.01),SREBP蛋白表达增多,差异具有统计学意义(P<0.05),p-GSK3β蛋白表达增多,SIRT1、ATG7 mRNA表达减少,SIRT1与ATG7荧光密度降低,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:电针提高大鼠胰岛素敏感性、改善胰岛素抵抗的作用,与上调肝脏SIRT1和ATG7水平、抑制成脂基因SREBP表达及改善脂肪代谢有关。