大黄鱼鱼鳔低聚肽的制备及其延缓皮肤衰老的研究OA北大核心

以超氧阴离子自由基清除率为指标,采用单因素试验和响应面试验筛选制备大黄鱼鱼鳔低聚肽(HSBP),并利用人皮肤永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)建立氧化损伤模型,检测HSBP对胶原蛋白、透明质酸分泌及抗氧化酶、β-半乳糖苷酶活力的影响,评价其氧化损伤修复活性;建立3D重组人表皮屏障损伤模型,分析HSBP对其组织形态学和皮肤屏障相关蛋白表达的影响,综合评价其延缓皮肤衰老的作用。结果表明:HSBP的最佳制备工艺为酶解时间4 h、酶解温度50℃、pH值7.5、菠萝蛋白酶添加量3400 U/g,在此工艺下,超氧阴离子自由基清除率为65.6%;HSBP的重均分子量为480 Da,无刺激性、无致敏性且无细胞毒性;HSBP能显著促进体外培养的氧化损伤细胞分泌透明质酸、Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白,同时提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性;此外,HSBP还能降低丙二醛和β-半乳糖苷酶的含量,显著提高屏障损伤模型丝聚蛋白、兜甲蛋白、谷氨酰胺转移酶Ⅰ和水通道蛋白3的表达量,有效修复屏障损伤的皮肤组织状态,并明显增加活细胞层数。因此,HSBP能有效保护氧化损伤皮肤细胞并修复皮肤屏障损伤,起到延缓皮肤衰老的作用。