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豆豉纤溶酶基因的异源表达及其重组菌在淡豆豉中的应用OA北大核心

中文摘要

从不同来源及不同发酵阶段的淡豆豉中分离筛选出65株优势菌,通过酶联免疫吸附法测定纤溶酶活性,得到一株高产纤溶酶的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)20-1,并扩增其纤溶酶基因,在毕赤酵母中异源表达,获得高产纤溶酶的重组菌株Pichia pastoris pPIC9K-his-aprEBS2,重组菌中该基因表达水平是出发菌株的5.8倍,培养48 h后纤溶酶活性达到(3 025.59±201.27)U/mL,是出发菌株的8.9倍;经优化,其活性可达(8 698.24±180.73)U/mL。通过急性毒性实验证明,该重组菌无毒。利用该重组菌纯种发酵淡豆豉,淡豆豉中纤溶酶活性达到(17 287.02±103.20)U/g,通过理化指标监测、感官特性分析及电子舌分析,重组菌可以提高淡豆豉的感官及风味。重组菌发酵的淡豆豉成品血栓溶解率可达到(60.55±1.58)%,高于市售淡豆豉。

徐菁雯;乌日娜;王伟明;阎亦然;向雪琴;赵玉莲;武俊瑞;王亚琦;邓丽;童星;史海粟

沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110866 辽宁省食品发酵技术工程研究中心,辽宁沈阳110866沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110866 辽宁省食品发酵技术工程研究中心,辽宁沈阳110866黑龙江省中医药科学院,黑龙江哈尔滨150001沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110866 沈阳市微生物发酵技术创新重点实验室,辽宁沈阳110866沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110866 沈阳市微生物发酵技术创新重点实验室,辽宁沈阳110866沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110866 辽宁省食品发酵技术工程研究中心,辽宁沈阳110866沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110866 沈阳市微生物发酵技术创新重点实验室,辽宁沈阳110866佛山市海天(高明)调味食品有限公司,广东佛山528000佛山市海天(高明)调味食品有限公司,广东佛山528000佛山市海天(高明)调味食品有限公司,广东佛山528000沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110866 辽宁省食品发酵技术工程研究中心,辽宁沈阳110866 沈阳市微生物发酵技术创新重点实验室,辽宁沈阳110866

轻工业

豆豉纤溶酶异源表达毕赤酵母淡豆豉

《食品科学》 2025 (4)

P.68-80,13

国家自然科学区域创新联合发展基金项目(U20A20400)沈阳农业大学科技创新平台项目(21-103-01421-104-0-28)沈阳农业大学人才引进(高层次)科研启动费项目(2023YJRC002)广东省调味食品生物发酵先进技术企业重点实验室开放基金项目(2017B030302002)。

10.7506/spkx1002-6630-20240628-211

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