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NPY、TSH-β、CaBP-28K基因在鸭繁殖期组织中的表达水平分析北大核心CSTPCD
作者：李亨陈宽维李慧芳薛素美刘宏祥
发表期刊：中国畜牧杂志 2011年17期
关键词：NPYTSH-βCaBP-28K实时荧光定量繁殖期高邮鸭
摘要：本研究对繁殖期高邮鸭神经肽Y(NPY)、促甲状腺激素β(TSH-β)、钙结合蛋白-D28K( CaBP-28K)基因在中枢神经组织和周围组织表达量进行了实时荧光定量分析.结果表明:NPY基因在下丘脑中表达量显著高于在垂体和在小肠中的表达量(P＜0.05),在卵巢、心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胰腺、子宫、胸肌、腿肌等9个部位呈痕量表达；TSH-β基因在垂体、小肠中表达量较高,显著高于其他组织(P＜0.05)；CaBP-28K基因在小肠…查看全部>>
KLK4 mRNA实时荧光定量检测方法研究北大核心CSTPCD
作者：于晶胡成进闻新棉
发表期刊：山东医药 2007年11期
关键词：实时荧光定量PCRKLK4基因表达
摘要：应用SYBR Green I作荧光染料,利用磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)作内对照,建立KLK4 mRNA的实时荧光定量(FQ-PCR)检测方法.结果建立的FQ-PCR方法扩增GAPDH和KLK4 mRNA的效率分别为0.98和0.96;检测GAPDH和KLK4的批内变异系数(CV)分别为0.8%和1.6%,批间CV分别为3.9%和2.4%;基因扩增产物DNA序列分析及熔解曲线分析表明该方法特异可靠.认为本研究建立的FQ-PCR检测…查看全部>>
丙酯草醚胁迫下靶标基因在油菜子叶胚状体中的表达特征北大核心CSCDCSTPCD
作者：万光龙耿鑫鑫吕晓刘宏波郭翔罗茜汪海燕周伟军
发表期刊：核农学报 2011年1期
关键词：油菜子叶胚状体丙酯草醚乙酰乳酸合成酶酮醇酸还原异构酶基因表达实时荧光定量PCR
摘要：以甘蓝型油菜品种浙双758为材料,利用小孢子离体培养和实时荧光定量PCR技术,研究了油菜子叶胚状体中ALS酶和KARI酶在不同浓度(0、1、10 mg/L)油菜田新型除草剂丙酯草醚(ZJ0273)处理下的生理活性、基因相对表达量差异及其动态变化特征.结果表明,ZJ0273处理后,ALS酶和KARI酶的活性发生了变化,均显著低于对照.说明其在支链氨基酸合成过程具有相应的作用.荧光定量PCR结果显示,随着胚状体分化时间的延长,ALS和KA…查看全部>>
实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-αmRNA基因表达CSTPCD
作者：陈晓王宇学
发表期刊：现代检验医学杂志 2006年4期
关键词：实时荧光定量反转录聚合酶链反应TNF-α基因
摘要：目的建立实时荧光定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测TNF-α基因mRNA表达.方法用T-A克隆技术构建含TNF基因的载体作为标准模板,采用荧光Taqman方法及探针标记技术,建立实时荧光定量RT-PCR方法,制备标准曲线,检测肿瘤患者与正常人外周血单个核细胞的TNF-α mRNA表达水平变化,并与半定量RT-PCR检测结果进行…查看全部>>
血管内皮生长因子(VEGF)实时荧光定量PCR质粒标准品的构建北大核心CSCDCSTPCD
作者：刘丽仙霍金龙李颖赵跃霍海龙曾养志
发表期刊：云南农业大学学报 2011年3期
关键词：实时荧光定量VEGF基因质粒标准品
摘要：应用SYBR Green荧光染料检测方法构建VEGF基因质粒标准品,能快速、灵敏、可靠的检测与临床多种疾病密切相关的重要候选基因血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况.本研究利用版纳微型猪近交系4～6月龄猪,提取皮肤创面总RNA,设计特异引物,进行RT-PCR扩增.纯化目的片段并与pMD18-T载体连接,转化宿主菌DH5α,提取重组质粒DNA,并经酶切、PCR和测序鉴定,计算重组质粒原液拷贝数浓度并制备梯度浓度标准品,进行实时荧光定量…查看全部>>
HCV-RNA定量检测与基因分型的研究
作者：王敏韩红星蒋小玲陆坚徐六妹
发表期刊：现代医药卫生 2006年11期
关键词：丙型肝炎病毒实时荧光定量基因分型
摘要：目的:探讨HCV-RNA定量检测和HCV基因分型的临床意义.方法:用荧光定量PCR法检测212例血清HCV-RNA或抗-HCV阳性标本,采用第三代ELISA夹心法检测抗-HCV,全自动生化分析仪测定ALT,应用RT-PCR法对78例标本进行基因分型.结果:在212例标本中HCV-RNA和抗-HCV双阳性的155例,两者阳性符合率73.1%(155/212),并且HCV-RNA载量和抗-HCV(+)例数呈正相关(r=0.92,P＜0.0…查看全部>>
实时荧光定量RT-PCR法建立版纳微型猪近交系中厚皮创面转化生长因子表达体系CSCDCSTPCD
作者：李颖霍金龙潘伟荣曾养志王继华
发表期刊：中国组织工程研究与临床康复 2011年7期
关键词：版纳微型猪近交系实时荧光定量转化生长因子基因克隆质粒标准品基因表达
摘要：背景:版纳微型猪近交系能较好的模拟人取皮区创面,构建动物模型,检测与创面愈合及瘢痕形成密切相关的转化生长因子的表达.目的:观察创面愈合过程中转化生长因子β1基因的表达情况.方法:利用版纳微型猪近交系4～6月龄猪构建了皮肤创面愈合动物模型,通过提取皮肤创面总RNA,设计特异引物,对与创面愈合相关密切的转化生长因子β1基因进行了RT-PCR扩增.纯化目的片段并与pMD18-T载体连接,转化宿主菌DH5α,提取重组质粒DNA,并经酶切、PC…查看全部>>
实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测火器伤骨折愈合过程中骨形态发生蛋白的表达CSTPCD
作者：李秉胜陈英剑张强范长春郑吉波蔡锦方
发表期刊：中国康复理论与实践 2006年11期
关键词：火器伤骨折骨形态发生蛋白(BMP-2)实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)
摘要：目的应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测兔火器伤骨折愈合过程中骨形态发生蛋白(BMP)-2 mRNA水平.方法建立外固定架固定一期治疗兔股骨火器伤骨折的动物模型和BMP-2 mRNA表达水平的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法,分别于术后第1、2、3、4周取断端组织,通过实时荧光定量RT-PCR检测标本标本中BMP-2 mRNA水平.结果在对照组,创伤后的兔骨组织BMP-2 mRNA表达水平在1周…查看全部>>
乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞活化的研究
作者：潘春琴袁国平牟思华
发表期刊：现代医药卫生 2004年8期
关键词：淋巴细胞活化:流式细胞技术实时荧光定量
摘要：目的:探讨HBV感染不同的临床结果以及HBV-DNA的复制与其外周血中淋巴细胞活化状况的关系.方法:应用流式细胞技术检测187例乙型肝炎患者及16例健康对照外周血中淋巴细胞的活化,同时利用实时荧光定量PCR测定其体内HBV-DNA载量.结果:以HLA-DR作为各T淋巴细胞的活化指标,急性肝炎恢复期和慢性肝炎患者活化的CD3+、CD4+和CD8+淋巴细胞明显高于健康对照和慢性病携带者(P＜0.05或P＜0.01).而在慢性肝炎中.病程越…查看全部>>
百日咳鲍特菌BP283基因的实时荧光定量PCR检测方法的建立CSTPCD
作者：罗炜王慧刘利东任筱兰赖克方
发表期刊：山东医药 2012年3期
关键词：百日咳鲍特菌实时荧光定量BP283基因
摘要：目的探讨检测百日咳鲍特菌BP283基因片段的有效方法.方法以百日咳鲍特菌BP283序列为目的基因,设计探针和引物,构建质粒标准品；建立FQ-PCR体系,优化反应条件,并进行方法学评价.结果成功构建了重组质粒pCR2.1-BP283；建立了检测BP283基因片段的FQ-PCR方法:标准曲线相关系数为0.998,最低检测浓度为102 copies/μL,对临床其他常见呼吸道病原体不出现特异性扩增曲线,批内及批间变异系数均＜4％.结论…查看全部>>

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