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牛p53基因真核表达载体构建及其在卵母细胞中表达定位北大核心CSCDCSTPCD
作者：张亚伟安鹏张德锋刘明兰雷安民
发表期刊：农业生物技术学报 2013年3期
关键词：p53基因体外转录显微注射牛卵母细胞
摘要：p53是一种肿瘤抑制基因,在细胞周期阻滞、细胞凋亡、衰老和自噬过程中发挥着调控作用,在机体的各个组织中广泛表达.本研究旨在构建牛p53基因真核表达载体并研究其在牛卵母细胞中的表达和定位.首先从牛(Bos taurus)卵丘细胞中克隆了p53基因并将其连接到pMD 19-T载体上,双酶切鉴定后定向连接到pVenus载体上构建了pVenus-p53真核表达载体,经脂质体2000介导转染Hela细胞,确定重组质粒在Hela细胞中的表达定位,…查看全部>>
卵泡大小对牛卵母细胞体外成熟影响的研究北大核心CSTPCD
作者：于永生李青旺胡建宏王立强常万存
发表期刊：畜牧与兽医 2003年9期
关键词：牛卵母细胞卵泡直径体外成熟体外发育
摘要：研究了牛不同大小卵泡(2～4 mm、4～6 mm、6～8 mm、>8 mm)中的卵母细胞的体外成熟及随后的发育能力.直径2～4 mm、4～6 mm、6～8 mm组的体外成熟率(60.8 %,65 %,61.7 %)显著高于直径>8 mm组(35.1 %);体外受精后的发育能力在2～4 mm、4～6 mm组显著优于6～8 mm、>8 mm组.
透明质酸对牛卵母细胞体外成熟影响的研究
作者：赵红卫李青旺胡建宏陈学进陈晓宇陈银清
发表期刊：家畜生态学报 2005年6期
关键词：透明质酸牛卵母细胞体外成熟卵裂率
摘要：在改良的基础培养液中添加HA,主要探讨HA对牛卵母细胞成熟的影响.结果表明,当mTCM-199中HA浓度为3.0 mg/mL时,第一极体排出率和卵裂率显著高于其他各组(P＜0.05),初步表明3.0 mg/mL是无血清培养中HA的最佳浓度.当在mTC-199中添加HA、BSA和OCS时,OCS组的第一极体排出率显著高于其他两组(P＜0.05),分别为83.40%、84.33%和92.17%,但HA组与BSA差异不显著(P＞0.05);…查看全部>>
尿嘧啶和ATP对牛卵母细胞成熟及激活后孤雌胚胎发育的影响北大核心CSCDCSTPCD
作者：黄伟伟马晓玲雷安民严兴荣贾文文谭晓颖窦忠英
发表期刊：安徽农业科学 2007年29期
关键词：牛卵母细胞体外成熟线粒体尿嘧啶ATP
摘要：[目的]探究尿嘧啶(Uracil)和三磷酸腺苷二钠盐(ATP)对牛卵母细胞成熟及激活后孤雌胚胎发育的影响.[方法]在体外成熟培养液中添加不同浓度的尿嘧啶和ATP,研究其对牛卵母细胞体外成熟及激活后孤雌胚胎发育能力的影响.[结果]在成熟培养液中添加50μg/ml尿嘧啶能够显著提高卵母细胞的成熟率、分裂率及孤雌胚胎囊胚率;在成熟培养液中分别添加0、250、500、750μg/mlATP,对卵母细胞成熟率影响不大,但添加5μg/ml …查看全部>>
牛去核卵母细胞能够被孤雌激活并发育到桑椹胚北大核心CSCDCSTPCD
作者：王志伟胡勇策马晓玲刘文强殷吉庆云彦雷安民
发表期刊：农业生物技术学报 2010年1期
关键词：牛卵母细胞Hoechst染色激光共聚焦
摘要：为了探讨实验牛去核卵母细胞能否被激活,及其激活后的发育能力,本研究利用化学激活法对牛去核卵母细胞进行孤雌激活,然后在体外颗粒细胞饲养层上进行培养,同时在不同的时间采用免疫荧光技术对α-微管蛋白(α-tubulin)进行染色,以观察去核卵母细胞与正常卵母细胞中微管分布动态变化的差别.结果表明去核卵母细胞经激活后在体外培养能够发育到桑椹胚,去核卵母细胞内α-tubulin的分布在分裂初期没有分区现象,对照组未去核卵母细胞内的α-tu…查看全部>>
p21基因在牛卵成熟中的表达检测及其真核表达载体构建北大核心CSCDCSTPCD
作者：赵贵民杨文琳吴苏君云彦雷安民
发表期刊：畜牧兽医学报 2011年8期
关键词：牛卵母细胞p21基因体外转录显微注射
摘要：本研究旨在检测p21基因在牛卵成熟过程中的表达,并构建其真核表达载体.首先利用RT-PCR和免疫荧光染色对不同成熟阶段牛卵内p21的mRNA和蛋白表达进行检测.然后从牛成纤维细胞中克隆了p21基因并构建pVenus-P21真核表达载体.经脂质体2000介导重组质粒pVenus-P21转染Hela细胞,通过荧光显微镜观察、RT-PCR检测,确认重组质粒在Hela细胞内的表达及定位.最后应用体外转录试剂盒将p21-venus体外转录为cR…查看全部>>
Ghrelin对牛卵母细胞体外成熟和体外受精的影响北大核心
作者：李阔王子馨赵高平鲁静孙伟李云霞李喜和曹贵方张传强
发表期刊：动物医学进展 2025年3期
关键词：生长激素释放肽牛卵母细胞体外成熟体外受精
摘要：研究不同浓度生长激素释放肽(growth hormone releasing peptide,GHRL)对牛卵母细胞体外成熟和发育的影响。应用免疫荧光染色法检测GHRL及生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)在牛卵和卵丘细胞中的定位,添加0、10、50、100 ng/mL的GHRL对牛卵母细胞进行体外成熟24 h后,检测卵丘细胞扩散程度;GDF 9、BMP 15 mR…查看全部>>
CdCl2对牛卵母细胞体外成熟及凋亡的影响北大核心CSCDCSTPCD
作者：刘涛李向臣关伟军马月辉
发表期刊：华北农学报 2011年5期
关键词：CdCl2牛卵母细胞体外成熟凋亡
摘要：利用不同浓度(0,0.8,1.6,2.4 μg/mL)的氯化镉(CdCl2)对处理牛卵母细胞前后对其成熟率、凋亡率、Ca2分布、线粒体膜电位、Bcl-2与Bax的基因表达的影响,初步为重金属对雌性哺乳动物生殖细胞发育及细胞凋亡机制的进一步研究打下基础.利用0,0.8,1.6,2.4 μg/mL的氯化镉(CdCl2)处理牛卵母细胞22 h,统计其凋亡率及死亡率；利用Annexin V-FITC检测牛卵母细胞的早期凋亡；分别用Fluo-3…查看全部>>
C型钠肽和半胱胺前成熟处理对牛卵母细胞发育能力的影响北大核心CSTPCD
作者：贾振伟
发表期刊：中国畜牧杂志 2018年9期
关键词：C型钠肽半胱胺牛卵母细胞发育能力
摘要：本研究旨在探讨C型钠肽(CNP)结合半胱胺前成熟处理牛卵母细胞对其减数分裂和发育能力的影响.以常规的体外成熟24 h培养为对照,CNP前成熟(添加或不添加半胱胺)处理牛卵母细胞6h,然后进行常规体外成熟培养,检测卵母细胞的成熟率以及体外受精后胚胎的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数.结果表明:与对照组相比,不论有无添加半胱胺,CNP前处理牛卵母细胞均未显著提高牛卵母细胞的成熟率和体外受精后的卵裂率(P＞0.05),但显著提高了受精后裳胚细胞总…查看全部>>
细胞松弛素B对牛卵母细胞体外成熟过程中微管、微丝及染色体的影响北大核心CSCDCSTPCD
作者：刘欣胡晓明白春玲程磊郜宇刘扬李光鹏
发表期刊：中国农业科技导报 2011年6期
关键词：牛卵母细胞细胞松弛素B减数分裂微丝微管染色体
摘要：细胞松弛素B(Cytochalasin B,CB)是一种抑制微丝聚合的药物,能抑制微丝的组装从而阻止胞质分裂和极体排放,是研究细胞分裂器形成与变化的重要药物.在牛卵母细胞体外成熟培养过程中加入7.5μg/mL的CB进行处理,分析CB对减数分裂过程中细胞骨架形态、染色体的排列与分离等方面的影响.结果显示,CB处理后卵母细胞第一极体的排放受到了抑制,染色体的排列和分离受到了影响,出现了同源染色体分离不完全或分离不均匀及分离后又聚在一起等异…查看全部>>

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