国家科技期刊平台

相关度

相关度
发表时间

每页显示10条

每页显示10条
每页显示20条
每页显示30条

已找到 85 条结果

稳定表达GFP-LC3的RAW264.7细胞系的建立北大核心CSCDCSTPCD
作者：庄燕贲晶晶柏惠陈琪
发表期刊：南京医科大学学报（自然科学版） 2009年6期
关键词：GFP-LC3基因转染RAW264.7细胞稳定表达自噬
摘要：目的:建立稳定表达GFP-LC3的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞系.方法:构建pcDNA3.1-GFP-LC3真核表达载体,应用转染技术将该质粒导入RAW264.7细胞,用G418筛选稳定表达的细胞系.真核细胞中GFP-LC3的表达分别用荧光显微镜与Western blot方法检测,并利用该稳定表达细胞系观察内质网应激时细胞发生自噬的情况.结果:成功获得2株转染并经G418反复筛选的RAW264.7细胞系,在倒置荧光显微镜下观察可见…查看全部>>
稳定表达HIV-1 GagPol基因真核表达载体的构建与鉴定北大核心CSTPCD
作者：张一折王鹏张守涛刘伟刘国祥
发表期刊：郑州大学学报（医学版） 2009年1期
关键词：HIV-1GagPol基因稳定表达病毒样颗粒疫苗
摘要：目的:构建能稳定表达HIV-1 GagPol基因的真核表达载体.方法:用PCB方法扩增HIV-1 GagPol基因,克隆入pMD18-T,然后亚克隆人真核表达质粒pcDNA3.2(一)中,将构建的重组质粒pcDNA3.1(-)/GagPol分别瞬时和稳定转染HEK293细胞,经G418筛选,建立稳定转染GagPol基因的细胞系,并应用Western Blot方法鉴定表达产物.结果:酶切鉴定和Western Blot检测证实重组质粒pc…查看全部>>
人β3-AR和PPAR-γ2基因真核表达载体及β3-AR稳定表达细胞株的构建北大核心CSCDCSTPCD
作者：黄琼赵昕李慧华尹继业周宏灏刘昭前
发表期刊：中国药理学通报 2008年4期
关键词：基因克隆稳定表达β3-ARPPAR-γ2神经母细胞瘤细胞
摘要：目的构建高效表达人β3-肾上腺素受体(hβ3-AR)的真核细胞表达载体,为进一步研究hβ3-AR的功能以及与过氧化物酶体增殖体激活受体-γ2 (PPAR-γ2)调控基因之间的相互影响奠定基础.方法从人肾旁脂肪组织提取总RNA,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法扩增hPPAR-γ2、hβ3-AR cDNA全长序列.将EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后的hβ3-AR cDNA与同样进行EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切的pcDNA 3.…查看全部>>
信号肽重组mBD2在宫颈癌细胞中的稳定表达及活性测定CSCDCSTPCD
作者：魏晓丽李明远李虹施桥发李婉宜蒋忠华
发表期刊：四川大学学报（医学版） 2007年2期
关键词：rmBD2稳定表达免疫荧光RT-PCR细胞生长曲线
摘要：目的探讨鼠重组beta防御素2(rmBD2)对SiHa细胞增殖的影响.方法采用脂质体转染法将真核表达质粒pcDNA3.1(+)/rmBD2转染SiHa细胞系,G418筛选出稳定表达细胞克隆.分别采用间接免疫荧光染色、RT-PCR方法检测稳定转染细胞中rmBD2蛋白和rmBD2 mRNA表达,并采用MTT法对稳定转染细胞株进行细胞增殖能力的测定.结果采用100 μg/mL的G418浓度筛选质粒转染的SiHa细胞20 d,得到了rm…查看全部>>
乙酰肝素酶稳定表达细胞株的建立北大核心CSCDCSTPCD
作者：瞿小婷赵华军张中华侯永泰奚涛
发表期刊：中国药科大学学报 2006年1期
关键词：乙酰肝素酶肿瘤转移稳定表达
摘要：目的:在真核细胞中表达人乙酰肝素酶(HPA)并建立该酶的稳定表达细胞株.方法:构建包含人乙酰肝素酶全长编码序列的真核表达载体pcDNA-hpaFL,转染CHO-K1细胞,G418筛选稳定表达细胞株.通过RT-PCR,Western-blot分析与鉴定蛋白的表达;用荧光HPLC法检测蛋白的活性.结果:在CHO-K1细胞中成功地表达出有活性的人乙酰肝素酶,并获得该酶的稳定表达细胞株.结论:成功地建立了人乙酰肝素酶稳定表达细胞株,为其抑制剂…查看全部>>
人干扰素IFNα-2b在果蝇细胞中的稳定表达CSCDCSTPCD
作者：孙浩梁布锋
发表期刊：生命科学研究 2007年2期
关键词：人干扰素IFNα-2b果蝇S2细胞果蝇表达系统稳定表达
摘要：以人干扰素IFNα-2b全长基因的质粒为模板,PCR扩增,PCR产物克隆到表达载体获得重组质粒,经转染和筛选,得到稳定表达的果蝇S2细胞株.经CuSO4诱导表达并对表达产物进行检测,结果显示,在果蝇S2细胞中成功地进行了人干扰素IFNα-2b的蛋白表达,表达产物的大小约为26 kD.并且,通过体外的抗病毒活性测定,证明所表达蛋白具有抗病毒活性.该研究为进一步利用该系统表达真核细胞蛋白,研究其结构和功能提供了重要的基础.
汉坦病毒H8205株G1-G2/人源白细胞介素2融合基因的稳定表达和免疫效果
作者：熊颖张泽华黄汉菊
发表期刊：内科理论与实践 2007年4期
关键词：汉坦病毒融合基因稳定表达人源白细胞介素2
摘要：目的:探讨汉坦病毒H8205株G1-G2/人源性白细胞介素2 (IL-2)融合基因在非洲绿猴肾(Vero)细胞获得稳定表达的可能性,评价融合基因pcDNA3.1/HisB-IL-2-G1-G2的DNA免疫效果.方法:在脂质体介导下,将pcDNA3.1/HisB-IL-2-G1-G2导入Vero细胞,通过G418筛选获得阳性克隆,用间接免疫荧光(IFAT)、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)等方法检测其在Vero细…查看全部>>
人神经营养因子-3在哺乳动物细胞中瞬时表达和稳定表达的初步研究北大核心CSCD
作者：欧阳立明张嗣良周涛薛冲刘志敏
发表期刊：华东理工大学学报（自然科学版） 2001年3期
关键词：人神经营养因子-3真核表达载体pcDNA3背根神经节瞬时表达稳定表达
摘要：将人神经营养因子-3全长cDNA克隆入真核表达载体pcDNA3,分别在COS-7细胞和CHO细胞中获得了瞬时表达和稳定表达.经大乳鼠脊髓背根神经节测活,瞬时表达和稳定表达产物均能明显促进其神经突起的生长,瞬时表达量约为10-7g/mL,稳定表达量可达10-8g/mL.
pEGFP-N1/Arf6-T27N重组真核表达载体的构建及其在人乳腺癌细胞株中的表达北大核心CSCDCSTPCD
作者：李卫星杜军胡圳圳
发表期刊：南京医科大学学报（自然科学版） 2011年11期
关键词：Arf6-T27NMDA-MB-231人乳腺癌细胞基因转染稳定表达细胞迁移
摘要：目的:构建含有Arf6-T27N基因的重组真核表达载体,并检测Arf6-T27N蛋白在MDA-MB-231人乳腺癌细胞中的表达情况,以期为深入研究Arf6在乳腺癌细胞迁移中的作用机制奠定基础.方法:从含Arf6-T27N基因的真核表达质粒pXS-Arf6-T27N中扩增出Arf6-T27N基因,插入pEGFP-N1载体中构建成pEGFP-N1/Arf6-T27N,利用脂质体将其转染MDA-MB-231人乳腺癌细胞.用新霉素筛选稳定表达…查看全部>>
癌基因C-jun及其缺失突变体过表达细胞株的构建与鉴定北大核心CSTPCD
作者：余斯琦朱长军
发表期刊：天津师范大学学报（自然科学版） 2020年2期
关键词：转录因子C-jun缺失突变体细胞株稳定表达
摘要：为了探究转录因子C-jun在细胞中的生理功能,以真核细胞表达质粒pFlag-c-jun为模板,首先设计了C-jun DNA结合功能域缺失突变体的点突变引物序列,构建Flag-C-jun DNA结合功能域缺失突变体质粒pFlag-c-junmut.通过细胞转染、药物筛选等方法,获得Flag-C-jun和Flag-C-junmut稳定表达的HelaS细胞株,用蛋白印记迹交和细胞免疫荧光染色方法对细胞株进行验证.鉴定结果表明,本研究成…查看全部>>

12 3 4 5 6 >