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重组质粒phPPARδ-IRES2-EGFP高效体外转染表达体系的建立北大核心CSTPCD
作者：章涛万敬员杨俊卿周元国周岐新
发表期刊：广西医科大学学报 2007年4期
关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体δ转染效率真核表达293细胞
摘要：目的:建立phPPARδ-IRES2-EGFP重组质粒高效体外转染表达的体系.方法:采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000将phPPARδ-IRES2-EGFP转染入293细胞,荧光显微镜观察质粒转染细胞GFP报告基因表达强度及转染效率,并对转染细胞hPPARδ的表达进行荧光定量PCR和Western Blot检测.结果:荧光显微镜下可见转染phPPARδ-IRES2-EGFP质粒的293细胞绿色荧光蛋白(GFP)报告基…查看全部>>
纳米羟基磷灰石可介导转染人肺癌A549细胞北大核心CSCDCSTPCD
作者：郑庆丰王建军应敏刚柳硕岩韩颖超
发表期刊：基础医学与临床 2009年3期
关键词：羟基磷灰石纳米颗粒多聚赖氨酸转染效率A549细胞
摘要：目的探讨纳米羟基磷灰石(nHAP)介导带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的pGenesil-1质粒转染人肺癌A549细胞的可行性.方法用均相沉淀法制备nHAP;透射电镜观察纳米粒结构;经超声分散及碳酸钠预处理后,在pH值7.4环境下应用多聚赖氨酸(PLL)修饰nHAP;实验分为nHAP-PLL组、脂质体组及对照组,分别配制转染复合物并转染A549细胞;荧光显微镜观察EGFP的表达;流式细胞仪检测pGenesil-1的转染率.结…查看全部>>
阳离子脂质体基因载体的细胞转染研究北大核心CSTPCD
作者：姜云霞王冰崔韶晖赵轶男杨宝灵段艳王秀武张树彪
发表期刊：安徽农业科学 2009年17期
关键词：阳离子脂质体转染效率MTT
摘要：研究阳离子脂质体在不同细胞中的转染效率及毒性.首先采用DNA延滞实验研究Lipofectamine2000、DOTAP转染试剂与DNA的结合能力.然后选用绿色荧光蛋白的质粒pGFP-N2作为报告基因模型和转染试剂制成复合物后转染Hela、7721、HT29细胞,比较多种因素对转染的影响.最后使用MTT比色法分析Lipofectamine2000、DOTAP转染试剂对细胞的毒性.随着复合物中转染试剂比例的增加,Lipofectamine…查看全部>>
水/油/水双乳化技术制备高效性神经生长因子CSCDCSTPCD
作者：谷海刚李晓滨龙大宏
发表期刊：中国组织工程研究 2012年21期
关键词：神经生长因子基因纳米粒子聚乳酸-聚乳二醇酸壳聚糖Tat多肽转染效率
摘要：背景:神经生长因子是大分子蛋白类物质,很难透过血脑屏障,基因治疗可以有效地将神经营养因子投递到脑内.目的:探索制备高效性神经生长因子基因纳米粒子的方法.方法:利用水/油/水(W/O/W)双乳化技术制备神经生长因子基因纳米粒子,用壳聚糖对其进行表面修饰,同时偶联Tat多肽.切断穹隆-海马伞诱使基底前脑胆碱能神经元溃变.16只SD雄性大鼠随机数字表均分成损伤组和基底前脑显微注射神经生长因子基因的纳米粒子组.结果与结论:制备的纳米粒子粒径分…查看全部>>
Xfect介导重组质粒pEGFP-C2/LAT-ORF3高效转染Vero细胞的方法及其条件的优化北大核心CSCD
作者：薛礼长杨慧兰
发表期刊：生物技术通报 2011年1期
关键词：Xfect转染效率Vero细胞绿色荧光蛋白
摘要：旨在用Xfect试剂介导重组质粒pEGFP-C2/LAT-ORF3转染Vero细胞,以期获得转染效率较高的方法,并检测目标片段的表达,从而为进一步研究HSV-2 LAT基因及其ORF3片段的生物学功能莫定基础.用Meet试剂介导重组质粒pEGFP-C2/LAT-ORF3转染Vero细胞,48 h后观察荧光表达情况,并计算不同转染方法分别在有无血清及质粒与Xfect Polymer比例不同时的转染效率.用RT-PCR检测ORF3片段在V…查看全部>>
阳离子多聚物jetPEITM对原代培养的猪血管平滑肌细胞的转染效率研究北大核心CSCDCSTPCD
作者：席锐陈桢玥周俊吴春芳陆国平
发表期刊：中国现代医学杂志 2006年18期
关键词：平滑肌细胞jetPEITM寡核苷酸转染效率
摘要：目的研究转染试剂jetPEITM对原代培养的猪血管平滑肌细胞的转染效率.方法原代培养小型猪胸主动脉血管平滑肌细胞,体外合成双链寡核苷酸,jetPEITM与寡核苷酸按不同的氨基与磷酸基的比例(N/P)混合转染细胞,采用流式细胞仪和共聚焦荧光扫描仪检测jetPEITM对寡核苷酸的转染效率及细胞内定位情况,MTT法检测jetPEITM的细胞毒性作用.结果原代培养的猪血管平滑肌细胞jetPEITM转染率在N/P=10时可高达(90.89…查看全部>>
纳米基因载体的研究进展
作者：张建华高秉仁李斌杨永珠王成苟云久王志强陈文胜
发表期刊：微创医学 2007年2期
关键词：纳米基因载体基因治疗基因转染临床试验转染效率腺病毒载体非病毒载体病毒型
摘要：近年来，基因治疗迅速发展。基因治疗的主要过程是目的基因的获取和高效的基因转染。基因治疗成败的关键是基因治疗的载体系统。高效、安全是载体应具备的最基本条件。目前基因转染常用的载体有病毒型载体和非病毒型载体。病毒型载体在当前批准进入临床试验的基因治疗中占75％，转染效率通常在90％以上，但病毒蛋白有诱发机体产生免疫反应、体内潜在的病毒复制、生产成本高、不能反复应用、无靶向性等缺点。特别是在1999年的基因治疗临床试验中出现腺病毒载体致人死…查看全部>>
作为基因转移载体的乙型肝炎病毒衣壳对肝癌细胞的靶向性CSCDCSTPCD
作者：潘德键王东林王卫兵周锡建陈正堂
发表期刊：中国肿瘤生物治疗杂志 2007年3期
关键词：乙型肝炎病毒衣壳基因转移载体转染效率靶向性肝癌
摘要：目的:探讨乙型肝炎病毒衣壳作为基因转移载体对肝癌细胞的靶向性和有效性.方法:采用PEG 8 000病毒浓缩法、β-丙内脂法从能持续产生HBV的HepG2.2.15细胞上清液中制备乙型肝炎病毒衣壳(hepatitis B virus envelope,HBVE),用它包裹绿色荧光蛋白质粒(pIRS2-EGFP)后得到基因转移载体复合物HBVE-GFP,用脂质体包裹pIRS2-EGFP后得到基因转移载体复合物Liposome-GFP.用H…查看全部>>
山羊乳腺上皮细胞基因转染条件的优化北大核心CSCDCSTPCD
作者：杜珊马保华李亮亮刘军赵晓娥张涌
发表期刊：畜牧兽医学报 2012年1期
关键词：山羊乳腺上皮细胞电穿孔转染效率人β-防御素3基因诱导表达
摘要：为了优化外源基因转入乳腺上皮细胞的条件,本研究采用组织块培养法,从山羊乳腺组织中分离并获得了纯化的乳腺上皮细胞,通过染色角蛋白和测定生长曲线对其进行了鉴定和检测.然后利用电穿孔法将PEGFPC1载体导入乳腺上皮细胞,分别比较了在不同电压(120、140、160、180、200 V)、不同电击时长(5、10、15、20 ms)以及2株细胞(GMEC1、GMEC2)的不同代数(第1代、第3代、第5代、第9代)条件下的转染效率,并利用优化条…查看全部>>
低温缺氧条件下脂质体介导的寡核苷酸对人脐静脉内皮细胞-304的转染北大核心CSCDCSTPCD
作者：丰贵文于立新张宏涛赵显国
发表期刊：第一军医大学学报 2004年5期
关键词：脐静脉内皮细胞低温缺氧保存脂质体寡核苷酸转染效率
摘要：目的研究在Euro-Collins溶液(ECs)中,低温(4℃)缺氧条件下体内阳离子脂质体转染剂(In vivo liposome)介导NF-κB诱捕物寡核苷酸(NF-κB decoy ODN)在人脐静脉内皮细胞株ECV-304中的转染效率.方法 (1)将ECV-304在含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液中以37℃、5%CO2的条件培养,待生长至单层融合后,进行试验.(2)使用前配制脂质体-ODN复合物,脂质体与ODN的+/-…查看全部>>

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