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大豆花叶病毒HC-Pro基因保守序列克隆及其RNAi载体的构建北大核心CSCDCSTPCD
作者：高乐宋英培李凯章红运沈颖超翟锐智海剑
发表期刊：大豆科学 2013年6期
关键词：大豆花叶病毒HC-Pro基因克隆RNAiGATEWAY技术载体构建
摘要：大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)病是全球最主要的大豆病害之一,严重危害大豆的产量和品质.RNA干扰(RNA interference,RNAi)能够在mRNA水平特异性沉默同源靶基因,为抗病毒作物的培育提供了新的途径.本研究对国内外11个不同SMV流行株系的HC-Pro基因进行了核苷酸序列比对,并以SC3株系的cDNA为模板克隆出高度保守的268 bp的基因片段,进而利用GATEWAY技术构建了适合农杆…查看全部>>
烟草抗病毒相关R基因RNAi表达载体的构建CSCDCSTPCD
作者：杨帆王元英李凤霞孙玉合王鲁杨爱国苏振刚李元元赵百英刘慧
发表期刊：中国烟草科学 2012年1期
关键词：烟草病毒病R基因RNAiGATEWAY技术
摘要：RNA干扰介导的基因沉默是植物抗病育种和大规模分析功能基因快速而有效的方法.构建烟草抗病毒病相关R基因的RNAi表达载体并导入烟草可获得抗病毒病烟草材料,并为大规模分析鉴定烟草功能基因提供新方法.本研究利用绒毛状烟草基因组测序获得的R基因序列设计引物,通过PCR技术扩增出带有特异性结合位点attB的R基因部分序列.采用GATEWAY方法将目的基因的干扰片段插入到表达载体pH 7 GWIWG2(Ⅰ),成功构建了烟草抗病毒病相关R基因的RNAi表达载体.
大豆翻译起始因子4E 干扰片段克隆及其 RNAi载体构建北大核心CSCDCSTPCD
作者：高乐翟锐丁雪妮李凯章红运王涛智海剑
发表期刊：华北农学报 2014年4期
关键词：大豆花叶病毒eIF4E基因RNA干扰GATEWAY技术载体构建
摘要：应用基于RNA干扰（ RNA interference，RNAi）原理的大豆转基因技术，能够在转录水平沉默同源靶基因，这为转基因抗病毒作物的培育提供了新的策略。通过比对已报道的能与病毒VPg发生互作的10种植物的eIF4E氨基酸序列，确定出大豆eIF4E的保守区间为62～237位氨基酸序列，克隆出406 bp的干扰片段eIF4Ei（含58 bp特异性重组序列attB），进而采用GATEWAY技术构建了干扰表达载体pB7GWIWG2（Ⅱ…查看全部>>
大豆翻译延伸因子GmEF1A干扰载体的构建及大豆遗传转化北大核心CSCDCSTPCD
作者：廖文林栾鹤翔高乐丁雪妮宋英培殷金龙牛浩鹏智海剑
发表期刊：大豆科学 2016年6期
关键词：大豆花叶病毒GmeEF1A基因RNAiGATEWAY技术农杆菌介导大豆遗传转化
摘要：研究发现GmeEF1A与大豆花叶病毒的P3蛋白存在互作关系,并且参与SMV在大豆体内的繁殖.通过大豆GmeEF1A基因5个拷贝的核苷酸和氨基酸序列比对,确定其保守区间,克隆得到180 bp的干扰片段GmeEF1Ai.利用GATEWAY技术构建RNA干扰(RNA interference,RNAi)表达载体pB7GWIWG2 (Ⅱ)-eEF1 Ai,并通过农杆菌介导的子叶节转化法导入到受体大豆品种天隆1号中.测序结果显示重组质粒中插入的…查看全部>>