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内皮差异表达基因消减文库的构建及在创伤修复中的应用北大核心CSTPCD
作者：梁自文罗向东杨宗城
发表期刊：中国临床康复 2004年5期
关键词：内皮,血管细胞内毒素类DNA,互补/遗传学
摘要：目的:建立人脐静脉内皮细胞内毒素刺激后差异表达基因的消减cDNA文库.方法:提取培养人脐静脉内皮细胞内毒素刺激6 h后mRNAs,反转录合成cDNA,与对照组间进行抑制消减杂交富集差异表达基因,亚克隆入T/A质粒并转化感受态大肠杆菌.结果:成功构建了人脐静脉内皮细胞内毒素刺激后上调和下调差异表达基因两个消减cDNA文库,为进一步筛选新的内皮细胞活化相关基因打下基础.结论:经抑制消减杂交建立的消减cDNA文库富集并均一化了内毒素刺激后不…查看全部>>
E-box元件在p21基因表达调控中作用的研究CSTPCD
作者：孙荣距夏照帆杨宗城姚咏明赵晓东苏踊跃罗向东
发表期刊：感染、炎症、修复 2008年2期
关键词：p21E-box元件报告基因
摘要：目的:通过p21基因调控序列E-box位点的突变分析,研究E-box位点对p21基因表达调控的作用.方法:将人野生型p21基因启动子全长序列构建到荧光素酶报告基因载体pGL3-basic,并进一步对重组载体pGL3-p21p启动子E-box位点做定点突变,构建突变载体E1、E2、E3,分别转染人脐静脉血管内皮细胞株(ECV304细胞),DLR系统测定荧光素酶活性,并观察E-box位点突变前后荧光素酶活性变化.结果:测序结果表明野…查看全部>>
人类内皮活化相关新基因EOLA1真核表达载体的构建与鉴定CSTPCD
作者：梁自文杨宗城陈建陈渝
发表期刊：重庆医学 2006年10期
关键词：内皮细胞EOLA1基因表达
摘要：目的为筛选与新基因EOLA1(内皮高表达脂多糖相关因子1)相互作用蛋白,了解EOLA1基因功能奠定基础.方法应用菌液PCR技术,从贮存的含EOLA1基因全长cDNA的大肠杆菌DH5α中扩增其开放阅读框(ORF)序列,亚克隆到真核表达载体pGBKT7中,经酶切及测序进行验证.结果鉴定结果显示,EOLA1的ORF全部序列包含在所构建质粒的多克隆位点中,且序列比对完全相同,表明EOLA1真核表达载体构建成功.结论 EOLA1基因真核表达载体…查看全部>>
EOLA1基因小干扰RNA载体构建及其干扰效应检测北大核心CSCDCSTPCD
作者：刘月明杨宗城梁自文苏踊跃罗向东陈渝
发表期刊：解放军医学杂志 2004年10期
关键词：RNA干扰基因,EOLA1转染
摘要：目的构建人类新基因内皮高表达脂多糖相关因子1(EOLA1)特异性的小干扰RNA表达载体,并初步验证其对靶基因的抑制作用.方法构建绿色荧光蛋白(GFP)-EOLA1融合蛋白表达载体pEGFP-N2/EOLA1,并转染人ECV304细胞株,G418压力筛选获得稳定表达株;针对靶基因EOLA1,设计靶点特异性的寡核苷酸,插入pSlincer3.1/H1质粒.转染重组质粒到稳定表达GFP-EOLA1融合蛋白的ECV304细胞,通过观察转染细胞…查看全部>>
烟雾吸入伤后肺泡上皮液体清除机能的变化及其意义CSTPCD
作者：陶军杨宗城刘志远何保斌黎鳌
发表期刊：中国现代医学杂志 2000年7期
关键词：吸入伤肺泡上皮肺水肿液体转运β2-受体激动剂
摘要：目的:观察烟雾吸入伤后肺泡上皮液体清除功能的变化及其意义.方法 :Wistar大鼠42只,随机分为正常对照组(C组)、烟雾致伤组(I组)、阿咪洛利组(A组)、哇巴因组(O组)、阿咪洛利加哇巴因组(AO组)和特普他林组(T组).采用大鼠烟雾吸入伤模型. 伤后24h测定肺泡内液体清除率(ALC)、总肺水量(TLW)和肺血管外肺水量(EVLW).结果:I组 ALC降低46.8%,TLW和EVLW进一步增加;AO组ALC则降至最低点,TLW和…查看全部>>
吸入一氧化氮对犬烟雾吸入性损伤心肌酶谱的影响
作者：齐顺贞杨建民林洪武杨宗城黎鳌
发表期刊：解放军医药杂志 1998年1期
关键词：一氧化氮灼伤吸入性心肌损害心肌酶谱
摘要：目的:评价吸入一氧化氮（NO）对犬烟雾吸入性损伤时对心肌酶谱的影响。方法:烟雾吸入后,用17只犬随机分为2组,对照组（n=8）单纯吸氧（FiO₂,0.45）,治疗组（n=9）吸氧（FiO₂,0.45）+0.0045％（45ppm）NO,连续监测12h动脉血心肌酶谱变化。结果:,治疗组乳酸脱氢酶（LHD）、a-羟丁酸脱氢酶（a-HBD）、肌酸激酶（CK）和天冬氨氨基转移酶（AST）比对照…查看全部>>
吸入一氧化氮对犬烟雾吸入性损伤SOD和MDA的影响
作者：齐顺贞杨宗城
发表期刊：中国现代医学杂志 1998年8期
关键词：一氧化氮吸入性灼伤超氧化物歧化酶丙二醛
NO在外源性高浓度Ca2+损伤心肌线粒体中的作用北大核心CSCDCSTPCD
作者：梁晚益杨宗城黄跃生
发表期刊：中国病理生理杂志 2000年12期
关键词：线粒体钙一氧化氮
摘要：目的：探讨一氧化氮在外源性高浓度Ca2+损伤心肌线粒体中的作用。方法：正常心肌线粒体分为单纯L-精氨酸(L-Arg)组、Ca2+损伤组和左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)保护组，分别于含有20μmol/LEDTA、100μmol/L CaCl2以及1 μmol/L L-NAME+100μmol/L CaCl2的反应介质中孵育，然后测定线粒体活力、膜电位以及NO含量。结果：Ca2+损伤组线粒体活力、膜电位明显下降，而NO2／N03含量升…查看全部>>
犬吸入性损伤吸入一氧化氮对某些内源性血管活性物质的影响北大核心CSCD
作者：齐顺贞杨宗城
发表期刊：中国药理学通报 1998年1期
关键词：吸入性损伤一氧化氮吸入治疗血管活性物质
摘要：目的旨在评价吸入外源性ＮＯ对几种主要内源性缩血管活性物质的影响。方法以烟雾吸入性损伤犬模型为研究对象，１７只犬随机分为２组，对照组（ｎ＝８）单纯吸氧（ＦｉＯ２，０．４５）治疗组（ｎ＝９）吸氧（ＦｉＯ２，０．４５）＋０．００４５％（４５×１０＾－６）ＮＯ连续监测１２ｈ动脉血变化，数据进行了多个样本均数间方差分析。结果伤后两组血浆内皮素（ＥＴｓ），血管紧张素Ⅱ（ＡⅡ）肾上腺素（Ｅ）和去甲肾上腺素（
电刺激大鼠岛叶皮质及皮质下中枢对心脏自主神经功能的影响北大核心CSTPCD
作者：王艺明刘兴德杨宗城董为伟
发表期刊：中国临床康复 2004年21期
关键词：电刺激杏仁核丘脑心率
摘要：目的:观察电刺激大鼠岛叶皮质及皮质下中枢对心脏自主神经活性的影响.方法:将36只雄性健康大鼠随机分成6组,假手术组,岛叶周边躯体感觉皮质区组、岛叶刺激组、杏仁核组、下丘脑腹内侧核组、延髓迷走背核组,每组6只,用500μA,50 Hz电流进行电刺激,通电达1 h后,观察大鼠的心率、血压、心率变异性参数值.结果:①岛叶刺激组的血压、心率较假手术组和岛叶周边躯体感觉皮质区组有明显升高,差异有显著性意义(P＜0.01).②岛叶、杏仁核、丘脑下…查看全部>>

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