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- 乳酸菌的分离和鉴定及其1,3-PDO的活性测定北大核心CSCDCSTPCD
- 克雷伯杆菌生产1,3-丙二醇关键酶酶活分析方法研究摘要：有氧条件下,建立了克雷伯杆菌破碎方法及其生产1,3-丙二醇代谢途径中关键酶酶活测定方法.超声波细胞破碎优化条件为:超声频率30kHz,100%振幅,间歇频率0.6,超声时间12min.细胞抽提液中甘油脱氢酶、1,3-丙二醇氧化还原酶、甘油脱水酶酶活测定的最适pH分别为12、9.5和7.0,最适温度分别为45℃、45℃和37℃.甘油脱氢酶、1,3-丙二醇氧化还原酶用初速度法测定.甘油脱水酶用终止法测定.
- dhaT基因克隆及其与gldABC基因串联表达载体的构建北大核心CSCDCSTPCD摘要：以肺炎克雷伯氏菌As1.1736的基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到了目的基因(dhaT)并将该基因克隆至pMD19-TSimple载体.基因的序列分析表明,dhaT基因全长为1164bp,编码387个氨基酸.将含有自身核糖体结合位点的dhaT基因片段插入到pMD19-TSimple/gldABC质粒的gldABC基因下游,形成重组克隆质粒pMD19-T Simple /gldABC-dhaT,并进一步将gldABC与…查看全部>>
- 丁酸梭杆菌VPI 3266甘油脱水酶和1,3-丙二醇氧化还原酶的克隆、表达北大核心CSCDCSTPCD摘要：对丁酸梭杆菌VPI 3266的1,3-丙二醇代谢途径关键酶甘油脱水酶（DhaB）与1,3-丙二醇氧化还原酶（DhaT）进行了研究。甘油脱水酶基因dhaB全长3315bp，编码两个蛋白亚基，分别为甘油脱水酶的核心酶和脱水酶的再激活酶。前者全长2367bp，编码788个氨基酸，后者全长918bp，编码305个氨基酸。通过构建重组质粒，使其在大肠杆菌中实现了活性表达。1,3-丙二醇氧化还原酶基因dhaT全长1166bp，编码388个氨基酸，…查看全部>>
- 基于理性设计提高1,3-丙二醇氧化还原酶的稳定性和活性CSTPCD
- 克雷伯杆菌生产1,3-丙二醇关键酶发酵条件研究北大核心CSCDCSTPCD
- 来源于克雷伯氏菌的1,3-丙二醇氧化还原酶的同源建模CSCD摘要：用Swiss-Model和Modeller对来源于Klebsiella pneumonide的1,3-丙二醇氧化还原酶(PDOR)进行三级结构建模,并对所得的6个目标模型进行评价和比较,从中选择最好的一个模型,预测了辅酶NADP+和Fe2+在PDOR结构空间的近似住置,并定位了与NAP+和Fe2+作用的相关残基.
- 1,3-丙二醇氧化还原酶结构与功能关系的探讨摘要：用生物信息学方法对来源于klebsiella pneumonide的1,3-丙二醇氧化还原酶(即1,3-丙二醇氧化还原酶,PDOR)进行高级结构模建,并搜索其功能位点,以所得三维结构为对象,定位其铁信号结合位点、辅酶NADP大致位置以及可能的底物结合部位;在此基础上模拟PDOR活性部位,探讨该酶的构效关系.
- 重组1,3-丙二醇氧化还原酶酶学性质和稳定性的研究北大核心CSCDCSTPCD摘要：1,3-丙二醇氧化还原酶(PDOR)是以甘油为底物生产1,3-PD途径中的关键酶之一.将dhaT在E.coli BL21(DE3)pLysS进行了表达,对含有6×His标记的PDOR进行了纯化,同时考察了重组PDOR的酶学性质和稳定性.重组PDOR反应的最适pH和温度分别是10.0和55℃;在pH 7.0～8.0,酶保持了较高的稳定性,酶在30℃保温表现出较高的稳定性;Ca2+,Mg2+和Cu2+对酶活性有抑制作用,而Fe3+,Na+…查看全部>>
- 克雷伯氏肺炎杆菌生产1,3-丙二醇代谢途径中的酶活变化北大核心CHSSCDCSCDCSTPCD摘要：考察了不同条件下克雷伯氏肺炎杆菌(Klebsiella.pneumoniae)合成1,3-丙二醇(1,3-PD)的3种关键酶(甘油脱氢酶(GDH)、1,3-PD氧化还原酶(PDOR)及甘油脱水酶(GDHz))的表现酶活变化.结果显示:这3种酶的酶活变化与Klebsiella.pneumoniae的1,3-PD代谢不完全相关.用SDS-PAGE电泳分析上述不同发酵条件下酶活变化,结果显示不同于3种酶的蛋白条带,Mr约为4.0×104位置…查看全部>>